Análise do papel da autofagia coordenada por NRF2 e seu impacto na resposta à quimioterapia em células de glioblastoma

Resumo

O glioblastoma representa um diagnóstico devastador para o paciente, tendo em vista que, sem tratamento, sua sobrevida média é de somente 4 meses. Esse tempo é elevado para 12 meses após ressecção cirúrgica seguida da radioterapia, com a combinação da temozolomida (TMZ), quimioterápico padrão, somando apenas mais 3 meses a esse período. Sendo justamente a frequente resistência desenvolvida ao TMZ um dos maiores obstáculos para o prolongamento da sobrevida dos pacientes com glioblastoma. E para que as células cancerígenas consigam resistir ao quimioterápico, um dos mecanismos mais frequentemente utilizados por elas é a autofagia, que é um processo altamente conservado evolutivamente de proteção contra agentes estressores. Assim, a autofagia pode ter uma perspectiva positiva ao buscar uma modulação desse processo como ferramenta suplementar para aprimorar terapias já estabelecidas. Interessantemente, o silenciamento de NRF2, fator de transcrição capaz de induzir a autofagia, permitiu a sensibilização de células de glioblastoma ao TMZ. No entanto, os estudos já realizados se limitam a investigações sobre a relação de NRF2 com a autofagia mediada por chaperona (CMA) e macroautofagia (MA) de maneira isolada, mesmo que já tenha sido verificada uma compensação robusta da atividade de MA em células deficientes em CMA e vice- versa. Logo, ainda é necessário entender a importância desse crosstalk funcional entre esses dois tipos de autofagia e sua coordenação por NRF2 como um todo para identificar o regulador chave e obter um eficiente aumento de sensibilização ao tratamento. Para isso, este projeto irá utilizar linhagens U251MG nocautes simples para o gene ATG7 e, de forma inédita, para o gene LAMP2A, além de ainda validar células U251MG duplo nocaute para ATG7 e LAMP2A. Com isso, esse projeto pretende esclarecer o papel da MA e da CMA coordenado pelo fator de transcrição NRF2 verificando a interação entre esses processos e seu impacto na resposta à quimioterapia no glioblastoma humano. Acreditamos que os resultados desse projeto poderão servir de base para aprimorar o manejo da autofagia junto à modulação de NRF2 e assim contribuir como alternativa terapêutica para o glioblastoma e impulsionar aprovações clínicas de medicamentos voltados a esse objetivo.