Componentes de veneno de aranha diminuem a migração e invasão de células de glioblastoma através da via RhoA-ROCK e Na/K-ATPas ²2: entidades moleculares com potencial para tratar câncer cerebral invasivo.

• Processo: 20/14644-0
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Publicações científicas - Artigo
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2021
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2021
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Farmacologia - Farmacologia Geral
• Pesquisador responsável: Catarina Raposo Dias Carneiro
• Beneficiário: Catarina Raposo Dias Carneiro
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCF). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Adesão celular Citoesqueleto Phoneutria nigriventer Desenvolvimento de fármacos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cancer therapy | cell adhesion | cell morphology | cytoskeleton | metastasis | Phoneutria nigriventer | Desenvolvimento de fármacos

Resumo

Introdução: As células de glioblastoma (GB) têm a capacidade de migrar e infiltrar o parênquima normal, levando à formação de tumores recorrentes, muitas vezes adjacentes ao local da extração cirúrgica. Recentemente, mostramos que o veneno da aranha Phoneutria nigriventer (PnV) tem efeitos anticâncer, principalmente na migração de linhagens de células de GB humano (NG97 e U-251). O presente trabalho teve como objetivo investigar os efeitos de componentes isolados do veneno na migração, invasividade, morfologia e adesão de células de GB, avaliando também a sinalização da via RhoA-ROCK e o envolvimento da Na+/K+-ATPase ²2 (AMOG).Métodos: Células de GB humano (NG97) foram tratadas com doze subfrações (SFs - obtidas por HPLC a partir do PnV). A migração e a invasão foram avaliadas por ensaios de cicatrização de feridas por arranhadura e transwell, respectivamente. A morfologia celular e o citoesqueleto de actina foram demonstrados por marcação com GFAP e faloidina. O ensaio com placa de poços revestidos com fibronectina foi feito para avaliar a adesão celular. O Western blotting demonstrou níveis de ROCK e AMOG e um inibidor de ROCK foi usado para verificar o envolvimento desta via. Os valores foram analisados pelo software GraphPad Prism e o nível de significância foi determinado usando análise de variância (ANOVA) seguida pelo teste de comparações múltiplas de Dunnett.Resultados: Duas (SF1 e SF11) de doze SFs diminuíram a migração e invasão em comparação com células do controle não tratadas. Ambas SFs também alteraram o citoesqueleto de actina, alteraram a morfologia celular e reduziram a adesão. SF1 e SF11 aumentaram a expressão de ROCK e a inibição desta proteína aboliu os efeitos de ambas as subfrações na migração, morfologia e adesão (mas não na invasão). SF11 também aumentou Na+/K+-ATPase ²2.Conclusão: Todos os componentes do veneno foram avaliados e duas SFs foram capazes de prejudicar as células de glioblastoma humano. ROCK, um efetor de RhoA, mostrou estar envolvido nos mecanismos de ambos os componentes do PnV. É possível que a AMOG medeie o efeito do SF11 na invasão. Outras investigações para isolar e caracterizar bioquimicamente as moléculas estão em andamento. (AU)