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EMU concedido no processo 2019/11820-5: ChemiDoc Imaging System e acessórios

Resumo

Recentemente, a Organização Mundial de Saúde classificou a sarcopenia como uma doença, fato que permitirá o estabelecimento de diretrizes clínicas universais para o seu diagnóstico e tratamento. Nesse sentido, a proteína rev-erb-alfa é um alvo molecular promissor para a prevenção e tratamento da sarcopenia, pois possui um importante papel na regulação da autofagia, conteúdo mitocondrial, função oxidativa e manutenção da massa muscular esquelética. Portanto, o presente projeto temático investigará a função do gene nuclear receptor subfamily 1 group D member 1 (Nr1d1) no desenvolvimento da sarcopenia associada ao envelhecimento através de experimentos em células, roedores e seres humanos. Para isso, serão utilizados os seguintes subprojetos: 1) Efeito do envelhecimento sobre a rev-erb-alfa e suas relações com a sarcopenia; 2) Efeito da deleção global ou condicional (músculo esquelético) do gene Nr1d1 sobre o envelhecimento; 3) Análise do interactoma da proteína rev-erb-alfa através da imunoprecipitação da proteína alvo e identificação de possíveis ligantes por espectrometria de massas em cultura de células; 4) Efeitos da ativação farmacológica, nutricional e genética do Nr1d1 sobre o processo de envelhecimento; 5) Efeitos do exercício físico sobre a sarcopenia associada ao envelhecimento: papel da rev-erb-alfa no músculo esquelético. As metodologias empregadas neste projeto serão RNA-seq, immunoblotting, Real time-RTqPCR, interactoma, espectrometria de massas, terapia genética (CRISPR/Cas9 e vetor viral adeno-associado), histologia, imuno-histoquímica, imunofluorescência, bioinformática e fluxo autofágico lisossomal. De acordo com a distribuição estatística dos dados, serão utilizados testes paramétricos ou não paramétricos para a comparação dos parâmetros estudados entre os grupos experimentais. (AU)

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