Moléculas com potencial antifúngico sobre Candida e Cryptococcus e investigação dos mecanismos de ação: inibição e morte celular

• Processo: 23/12190-0
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2024
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2026
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Farmácia
• Pesquisador responsável: Kelly Ishida
• Beneficiário: Kelly Ishida
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Ângelo de Fátima ; Marcio Vinicius Bertacine Dias
• Auxílio(s) vinculado(s): 24/01974-3 - Papel da miltefosina na interação de Cryptococcus neoformans com macrófagos e na terapia combinada com antifúngicos em modelo murino de criptococose, AP.R; 24/02673-7 - Urease: produção de proteína recombinante e desenvolvimento de inibidores para terapia antifúngica contra criptococose, AP.R SPRINT
• Assunto(s): Antifúngicos Candidíase Criptococose Urease
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Antifúngico | Candidíase | compostos sintéticos | Criptococose | Produto natural | urease | Micologia e Antifúngicos

Resumo

As infecções fúngicas invasivas (IFIs) são consideradas um problema de saúde pública que resultam em elevadas taxas de mortalidade e morbidade. Dentre as IFIs, Candida albicans representa 50-70% dos casos, seguidos por Cryptococcus e Aspergillus. Entretanto, espécies resistentes e emergentes têm sido frequentemente isoladas, como por exemplo Candida auris considerado um superfungo responsável por surtos em ambientes hospitalares em todos os continentes. Além da resistência aos antifúngicos, limitações como elevada toxicidade, farmacocinética desfavorável, alto custo e indisponibilidade, reduzem ainda mais as opções terapêuticas das infecções fúngicas. Assim, novos alvos, novas moléculas e formulações farmacêuticas estão sendo pesquisadas nos últimos anos como potenciais alternativas no tratamento das micoses. Nosso grupo de pesquisa tem investigado potenciais antifúngicos dentro dessas três abordagens e, portanto, esta proposta configura uma continuidade do projeto regular anteriormente aprovado pela FAPESP (2021/01279-5), cujo objetivo é estudar novos alvos em C. auris e em C. neoformans e avaliar atividade antifúngica de moléculas sobre Candida spp. e Cryptococcus spp. Isto posto, pretendemos neste projeto: i) clonar, expressar e purificar a urease de C. neoformans (CnURE) usando o modelo eucarioto Pichia pastoris; ii) resolver a estrutura de CnURE; iii) avaliar o efeito inibitório e a interação molecular dos inibidores com CnURE; iv) avaliar o efeito fungistático/fungicida e antibiofilme de moléculas sintéticas e de produtos naturais; v) avaliar os efeitos morfofisiológicos provocados pelas moléculas; vi) elucidar os mecanismos moleculares e de morte fúngica provocados pela molécula; vii) avaliar toxicidade dos compostos em linhagens celulares e modelo larvário de Galleria mellonella; e por fim, viii) avaliar o efeito antifúngico in vivo dos compostos selecionados usando G. mellonella e murinos infectados por Candida spp. ou Cryptococcus spp. (AU)