Detecção de espaçadores transcritos internos 1 e marcadores genéticos hsp70 usando restrição Polimorfismos de comprimento de fragmentos e sequenciamento na identificação de espécies de Leishmania Causando Leishmaniose Tegumentar no Brasil

• Processo: 23/16010-7
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Publicações científicas - Artigo
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2024
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2024
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Parasitologia - Protozoologia de Parasitos
• Pesquisador responsável: Lúcia Maria Almeida Braz
• Beneficiário: Lúcia Maria Almeida Braz
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FM). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Leishmania Reação em cadeia por polimerase (PCR)
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: American tegumentary leishmaniasis | heat shock protein hsp70 | internal transcript spacer 1 (ITS-1) | leishmania | polymerase chain reaction | restriction fragment length polymorphism | Diagnostico de doenças negligenciadas

Resumo

A identificação de espécies de Leishmania causadoras da leishmaniose tegumentar (LT) é importante para fins taxonômicos e prognósticos. A análise molecular utilizando diferentes alvos genômicos de Leishmania é a mais útil.método para identificação de espécies de Leishmania. Portanto, avaliamos o desempenho dos marcadores genéticos ITS1 e hsp70 por PCR seguido deRFLP e sequenciamento, para identificação de espécies de Leishmania.Amostrasde 84 pacientes brasileiros foram amplificados. A PCR ITS1 seguida de RFLP (HaeIII) identificou 46,4% das amostras como compatíveis com o subgênero Viannia. Sequenciamento ITS1 identificou Leishmania (Viannia) braziliensis em 91,7% (77/84) dos LTamostras, L.(l.)amazonensis em 3,6% (3/84), L.(V.) guyanensis em 2,4% (2/84) e L.(L.)infantum em1,2% (1/84) e 1,2% (1/84) das amostras apresentaram a mesma proporção de similaridade com L. (V.) guyanensis e L.(V.)panamensis.hsp70 nested PCR seguido de RFLP (HaeIII) identificou 91,7% (77/84) dosamostras como compatíveis com L.braziliensis/L. (V.) naiffi, 3,6% (3/84) com L.amazonensis, 1,2% (1/84) com L.(L.) infantum e 3,6% (3/84) com L.guyanensis. O sequenciamento de hsp70 identificou L.braziliensis em 91,7% (77/84) das amostras de TL, L.amazonensis em 3,6% (3/84), L. (V.) guyanensis em 3,6% (3/84),L. (L.) infantum em 1,2% (1/84). Nossas descobertas mostraram claramente que a hsp70-RFLP aninhada (HaeIII) é melhor que a ITS1-RFLP e que a PCR de ITS1 ou hsp70 seguida de sequenciamento foi adequada para identificar espécies de Leishmania. Nós tambémconstataram que L.braziliensis é a espécie mais comum causadora de LT no Brasil. Portanto, o sequenciamento de múltiplos genes-alvo, como ITS1 e hsp70, é mais preciso para identificar espécies de Leishmania. (AU)