Perfil de miRNAs circulantes e exossomais em fluidos biológicos de mulheres inférteis com endometriose.

• Processo: 24/06420-6
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2027
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina
• Pesquisador responsável: Thérèse Rachell Theodoro
• Beneficiário: Thérèse Rachell Theodoro
• Instituição Sede: Centro Universitário FMABC (FMABC). Santo André , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Bianca Alves Vieira Bianco ; Caio Parente Barbosa ; Erik Montagna
• Assunto(s): Endometriose Infertilidade Reação em cadeia da polimerase via transcriptase reversa quantitativa (qRT-PCR)
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: endometriose | Fluidos corporais | Infertilidade | miRNAs circulantes | miRNAs exossomais | qPCR | Biologia Molecular, Genética e Reprodução Humana

Resumo

A endometriose (EDT) é uma doença ginecológica inflamatória crônica caracterizada pela presença de tecido endometrial fora do útero e está associada às complicações reprodutivas, incluindo a infertilidade que afeta 10%-15% das mulheres em idade reprodutiva. Os mecanismos patofisiológicos que conectam a endometriose à infertilidade ainda não estão completamente esclarecidos, o que limita o desenvolvimento de estratégias diagnósticas e terapêuticas eficazes. Os miRNAs participam da regulação da expressão gênica pós-transcricional e podem influenciar no desenvolvimento e progressão da endometriose. Além disso, os miRNAs exossomais podem ser capazes de carregar a informação entre as células, promovendo a comunicação célula-célula e funções imunorreguladoras, através de exo-miRNAs, para as células receptoras. A liberação inadequada de exo-miRNAs pode causar alterações significativas nas vias biológicas que afetam o desenvolvimento de doenças, apoiando o conceito de que exossomos podem servir como terapias direcionadas para doenças, favorecendo transmissão de vários sinais inflamatórios, incluindo na endometriose. Os miRNAs circulantes e exossomais, podem ser detectados em fluidos corporais circulantes tornando-os biomarcadores pouco invasivos. Dentre os miRNAs já estudados em fluidos corporais na endometriose, foram selecionados: o mir-30e-5p e mir-15b-5p, como normalizadores devido estes miRNAs terem sido identificados em estudos de coorte como normalizadores através da média do mir-30e-5p e mir-15b-5p; o mir-let-7b, mostrou-se com menor expressão em mulheres com endometriose x sem endometriose em fluidos corporais como soro, além de estar envolvido na desregulação da via p53 e o controle do ciclo celular; o mir-30c-5p é mostrado com níveis aumentados em mulheres com endometriose x mulheres sem endometriose, além de sua diminuição estar relacionada com o aumento de mutações na via p53 pois inibem a proliferação, migração e invasão de células. A baixa expressão de mir-30c-5p exossomal em células epiteliais endometriais ectópicas de mulheres com endometrioma, levou à superexpressão de BCL9 (linfoma de células B9), sendo este um co-ativador da via Wnt/²-catenina, podendo assim apresentar capacidade potencial invasiva e migratória das lesões endometrióticas; o mir-214-3p apresenta relação com o processo de angiogênese e aumento nos níveis de VEGF em lesões endometrióticas fibróticas. Pacientes com miomas uterinos, mostraram a expressão de miR-214 aumentada e a via miR-214-PI3K-AKT foi sugerida como um dos mecanismos para tratar miomas uterinos como uma doença anormal da circulação sanguínea feminina. Assim, o miR-214-3p circulante pode ser um alvo terapêutico promissor para doenças fibróticas, incluindo a EDT. Em um modelo de roedor para endometriose, foi observada redução de fibrose em lesões ectópicas quando tratadas com exossomos derivados de células estromais endometriais ectópicos humanas transfectados com mimetizadores de exo-miR-214-3p. Além disso, estudos mostraram regulação negativa de exo-miR-214-3p em lesões ectópicas e endométrio eutópico de pacientes com endometriose em comparação com endométrio eutópico de controles e menor nível sérico de exo-miR-214-3p em pacientes com EDT. O presente estudo tem por objetivo a deteção de um perfil de miRNAs circulantes e exossomais em fluidos corporais como sangue periférico, soro, plasma e urina, como potenciais biomarcadores para diagnóstico e/ou alvos terapêuticos para EDT. Serão utilizadas técnicas específicas para a coleta dos fluidos corporais, isolamento de exossomos, extração de miRNAs (beads magnéticos) circulantes e exossomais isolados dos fluidos corporais. Além disso, a técnica de PCR em tempo real por TaqMan será aplicada para amplificação dos miRNAs específicos selecionados para EDT. Os resultados deste estudo podem levar ao desenvolvimento de testes diagnósticos precoces mais precisos e menos invasivos e tratamento mais eficaz com exossomos para endometriose. (AU)