Estudo das respostas celulares a danos no dna mitocondrial em celulas de mamiferos.

• Processo: 08/51417-0
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2008
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2010
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Metabolismo e Bioenergética
• Pesquisador responsável: Nadja Cristhina de Souza Pinto
• Beneficiário: Nadja Cristhina de Souza Pinto
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 08/08417-0 - Identificação de genes que afetam a taxa de mutações no DNA mitocondrial via RNA inibidor, BP.TT
• Assunto(s): Reparo do DNA Função mitocondrial Morte celular DNA mitocondrial
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Dna Mitocondrial | Funcao Mitocondrial | Lesoes Oxidativas | Morte Celular | Reparo De Dna

Resumo

Devido à sua localização na membrana mitocondrial interna, sítio de geração de grandes quantidades de espécies reativas de oxigênio, o DNA mitocondrial (mtDNA) é particularmente susceptível ao acúmulo de lesões oxidativas, que podem ser mutagênicas. Mutações no mtDNA podem ter conseqüências funcionais e causam várias doenças humanas. Apesar de recentes avanços no nosso conhecimento dos mecanismos de reparo e manutenção de estabilidade genética em mitocôndrias de mamíferos, ainda sabemos pouco sobre como as células respondem a lesões no mtDNA, e quais as conseqüências funcionais do acúmulo de lesões. Esse projeto propõe investigar especificamente as respostas de células de mamíferos em cultura ao acúmulo de lesões oxidativas no mtDNA. Nosso interesse é determinar qual a "carga máxima" de lesões oxidativas que são toleradas pelas mitocôndrias, e quais mecanismos de resposta a lesões no DNA são ativados preferencialmente após danos nesse genoma. Estudos recentes têm abordado a questão da relativa participação de danos no mtDNA para o processo de morte celular. Entretanto, a interpretação dos resultados publicados é complicada pelo fato de que a maioria dos agentes utilizados causava lesões nos dois genomas. Os experimentos propostos aqui utilizam um composto foro-reativo (azul de metileno), que em células vivas se acumula seletivamente em mitocôndrias. A comparação das respostas obtidas com esse modelo àquelas obtidas quando as células são expostas a oxidantes que atacam ambos os genomas permitirá separar as respostas que são exclusivas de lesões no mtDNA, e também identificar se lesões no DNA mitocondrial são necessárias e/ou suficientes para a ativação de programas de morte celular, como apoptose. (AU)