Enzimas proteolíticas envolvidas em processos fisiológicos e fisiopatológicos

• Processo: 08/56340-6
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2008
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2011
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
• Pesquisador responsável: Adriana Karaoglanovic Carmona
• Beneficiário: Adriana Karaoglanovic Carmona
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Enzimas proteolíticas Peptídeo hidrolases Metaloendopeptidases Cisteína proteases Substratos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cisteino Peptidases | Estudo De Especificidade | Inibidores | Metalo Peptidases | Substratos Especificos | Substratos Fluorogenicos

Resumo

As enzimas proteolíticas realizam uma variedade de funções essenciais para todos os organismos vivos. Genes de peptidases são encontrados nos genomas de todos os organismos celulares e de vários tipos de vírus, sendo responsáveis por aproximadamente 2% do produto gênico total, distribuídos em compartimentos celulares e teciduais. Entretanto, em vários estados patológicos as peptidases são expressas de forma desordenada, sugerindo que inibidores específicos destas enzimas poderiam ser usados como drogas. Embora a nossa proposta seja o estudo de diferentes classes de peptidases, o trabalho converge para um objetivo comum que é contribuir para um melhor entendimento da função destas enzimas usando substratos com supressão intramolecular de fluorescência. Estes substratos são muito sensíveis e possibilitam o monitoramento da velocidade de hidrólise direto na cubeta do fluorimetro ou nas leitoras de placa, tomando os ensaios simples e rápidos. Pela alta sensibilidade do método, estes compostos têm sido usados com sucesso no estudo de especificidade de todas as classes de peptidases e no ensaio de inibidores seletivos. Esta importante linha de pesquisa do nosso grupo possibilitou o estabelecimento de colaborações com diversos grupos nacionais e internacionais resultando em importantes publicações. Mais recentemente temos focado no estudo de duas classes de enzimas diretamente envolvidas em processos fisiopatológicos: metalo-peptidases (enzima conversora da angiotensina I e PHEX) e cisteino-peptidases lisossomais (catepsinas L, B, V, K e S). Para dar continuidade aos nossos estudos estamos solicitando no presente projeto a aquisição de dois espectrofluorimetros e um equipamento para purificação de proteínas pelo sistema FPLC (Akta) para substituir os que foram adquiridos a mais de 10 anos e que vem apresentando problemas devido ao uso prolongado. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

OLIVEIRA, MARCELA; ASSIS, DIEGO M.; PASCHOALIN, THAYSA; MIRANDA, ANTONIO; RIBEIRO, ELIANE B.; JULIANO, MARIA A.; BROEMME, DIETER; CHRISTOFFOLETE, MARCELO AUGUSTO; BARROS, NILANA M. T.; CARMONA, ADRIANA K.. Cysteine cathepsin S processes leptin, inactivating its biological activity. Journal of Endocrinology, v. 214, n. 2, p. 217-224, AUG 2012. (11/50495-0, 08/56340-6, 08/10700-1)