Regulação da isoforma 1 do trocador Na+/H+(NHE1)pelos sítios da calmodulina: Efeito da angiotensina II

• Processo: 10/19559-0
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Publicações científicas - Artigo
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2011
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2011
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia de Órgãos e Sistemas
• Pesquisador responsável: Maria Oliveira de Souza
• Beneficiário: Maria Oliveira de Souza
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Angiotensina II
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Angiotensin II | Calmodulin | Nhe1 | Fisiologia

Resumo

Nós examinamos o efeito da Ang II sobre a interação entre o complexo cálcio-calmodulina e o NHE1. Considerando que a calmodulina se liga ao NHE1 em 2 sitios (A e B), aminoácidos de ambos os sitios foram modificados e dois mutantes foram construídos: SA1K3R/4E e SB1E3R/4E.Clones de wild type e mutantes foram transfectados em células PS120 e a atividade do NHE1 foi avaliada por análise do fluxo de H+ (JH+). O JH+ basal de wild type foi 4.71 ± 0.57 (mM/min), valor similar aos mutantes. Ang II (10-12 e 10-9 M) aumentou o JH+ em wild type e mutante SB. Ang II (10-6 M) aumentou esse parâmetro em SA. Dimethyl-Bapta-AM (10-7 M) suprimiu o efeito de Ang II (10-9 M) em wild type. Com Ang II (10-6 M),o bapta não afetou a atividade de wild type ou SA, mas aumentou o JH+ de SB. W13 (10-5 M) reduziu o efeito de AngII (10-9 M) em wild type e SB. Com Ang II (10-6 M), W13 reduziu o JH+ em wild type ou SA e aumentou em SB. Assim, com Ang II (10-12 and 10-9 M),o SA parece ser o sitio responsável pela estimulação do NHE1 e com Ang II (10-6 M),o sitio B é importante para manter a atividade basal do trocador. (AU)