Caracterização e análise funcional do gene da proteína 14-3-3 envolvida no processo de adesão do complexo Paracoccidioides sp. e identificação de alvos potenciais na terapia da paracoccidioidomicose

• Processo: 11/18038-9
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2012
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2014
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina
• Pesquisador responsável: Maria José Soares Mendes Giannini
• Beneficiário: Maria José Soares Mendes Giannini
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCFAR). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 13/06303-5 - Caracterização e análise funcional do gene da proteína 14-3-3 envolvida no processo de adesão do complexo Paracoccidioides sp e identificação de alvos potenciais na terapia da paracoccidioidomicose, BP.TT
• Assunto(s): Microbiologia médica Micologia médica Paracoccidioidomicose Adesinas bacterianas Ácido gálico
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: ácido gálico | adesão | alvos terapeuticos | Complexo Paracoccidoides sp | Proteína 14-3-3 | Micologia Clínica

Resumo

A paracoccidioidomicose é micose causada pelo complexo Paracoccidioides sp. O sucesso da colonização dos tecidos do hospedeiro pelo fungo é um evento complexo, geralmente envolvendo um ligante codificado pelo patógeno (adesinas) e um receptor da célula. Em recentes estudos foi isolada uma proteína de P. brasiliensis ligante de laminina e caracterizada como pertencente à família 14-3-3. Já foi descrito que estas proteínas podem participar em processos de apoptose, transdução de sinal, regulação do ciclo celular e transcrição de forma ainda não determinada. Saccharomyces cerevisiae possui duas isoformas das proteínas 14-3-3, Bmh1 e Bmh2, codificadas pelos genes BMH1 e BMH2, respectivamente, que possuem 92% de identidade entre si e quando comparadas com as seqüências de aminoácidos da proteína 14-3-3 de P. brasiliensis, a isoforma Bmh1 de S. cerevisisae revelou uma identidade de 76% e a isoforma Bmh2, 80%. Assim, neste projeto, pretende-se utilizar o modelo de S. cerevisiae para estudar funcionalmente a proteína 14-3-3 de P. brasiliensis e de P. lutzii. Adicionalmente, com o objetivo de se investigar o potencial desta adesina como alvo para o delineamento de abordagens terapêuticas, será produzido anticorpo monoclonal específico a partir das moléculas recombinantes, a fim de se verificar a localização desta em sistema de infecção nos isolados de P. brasiliensis, P. lutzii e S. cerevisiae complementado com o gene da 14-3-3 de P. brasiliensis (homólogo funcional). Por outro lado, será realizado o estudo relacionado à estrutura e atividade antifúngica de moléculas derivadas do ácido gálico, tanto na levedura S. cerevisiae, homólogo funcional, quanto nos isolados do complexo Paracoccidioides sp para verificar a interferência dos ácidos gálicos no fungo e direcionar possíveis alvos associados nesta interação. (AU)

Publicações científicas

(6)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

ASSATO, PATRICIA AKEMI; DA SILVA, JULHIANY DE FATIMA; DE OLIVEIRA, HAROLDO CESAR; MARCOS, CAROLINE MARIA; ROSSI, DANUZA; VALENTINI, SANDRO ROBERTO; SOARES MENDES-GIANNINI, MARIA JOSE; ZANELLI, CLESLEI FERNANDO; FUSCO-ALMEIDA, ANA MARISA. Functional analysis of Paracoccidioides brasiliensis 14-3-3 adhesin expressed in Saccharomyces cerevisiae. BMC Microbiology, v. 15, NOV 4 2015. (11/18038-9)

DE OLIVEIRA, HAROLDO CESAR; DA SILVA, JULHIANY DE FATIMA; MATSUMOTO, MARCELO TERUYUKI; MARCOS, CAROLINE MARIA; DA SILVA, ROBERTA PERES; MORAES DA SILVA, ROSANGELA APARECIDA; VENEZIANO LABATE, MONICA TERESA; LABATE, CARLOS ALBERTO; FUSCO ALMEIDA, ANA MARISA; SOARES MENDES GIANNINI, MARIA JOSE. Alterations of protein expression in conditions of copper-deprivation for Paracoccidioides lutzii in the presence of extracellular matrix components. BMC Microbiology, v. 14, DEC 13 2014. (08/56476-5, 11/18038-9, 09/52046-9)

DE OLIVEIRA, HAROLDO C.; DA SILVA, JULHIANY DE FATIMA; SCORZONI, LILIANA; MARCOS, CAROLINE M.; ROSSI, SUEEN A.; DE PAULA E SILVA, ANA C. A.; ASSATO, PATRICIA A.; DA SILVA, ROSANGELA A. M.; FUSCO-ALMEIDA, ANA M.; MENDES-GIANNINI, MARIA J. S.. Importance of adhesins in virulence of Paracoccidioides spp.. FRONTIERS IN MICROBIOLOGY, v. 6, APR 10 2015. (11/18038-9)

MARIA MARCOS, CAROLINE; DE FATIMA DA SILVA, JULHIANY; CESAR DE OLIVEIRA, HAROLDO; AKEMI ASSATO, PATRICIA; DE LACORTE SINGULANI, JUNYA; MARIA LOPEZ, ANGELA; PATRICIA TAMAYO, DIANA; HERNANDEZ-RUIZ, ORVILLE; MCEWEN, JUAN G.; SOARES MENDES-GIANNINI, MARIA JOSE; et al. Decreased expression of 14-3-3 in Paracoccidioides brasiliensis confirms its involvement in fungal pathogenesis. VIRULENCE, v. 7, n. 2, p. 72-84, FEB 17 2016. (15/03700-9, 11/18038-9)

BERNARDI, THAIS; DA SILVA, JULHIANY DE FATIMA; VICENTIN, JULIANA; DE OLIVEIRA, HAROLDO CESAR; ASSATO, PATRICIA AKEMI; MARCOS, CAROLINE MARIA; ALVES DE PAULA E SILVA, ANA CAROLINA; MORAES DA SILVA, ROSANGELA APARECIDA; REGASINI, LUIS OCTAVIO; SIQUEIRA SILVA, DULCE HELENA; et al. Anti-apoptotic effects of decyl gallate on the induction of apoptosis in A549 pneumocytes by Paracoccidioides brasiliensis gp43. Medical Mycology, v. 55, n. 8, p. 890-894, NOV 2017. (11/18038-9, 15/14023-8, 16/17048-4)

DA SILVA, JULHIANY DE FATIMA; DE OLIVEIRA, HAROLDO CESAR; MARCOS, CAROLINE MARIA; MORAES DA SILVA, ROSANGELA APARECIDA; DA COSTA, TANIA ALVES; GARCIA CALICH, VERA LUCIA; FUSCO ALMEIDA, ANA MARISA; SOARES MENDES-GIANNINI, MARIA JOSE. Paracoccidoides brasiliensis 30 kDa Adhesin: Identification as a 14-3-3 Protein, Cloning and Subcellular Localization in Infection Models. PLoS One, v. 8, n. 4, APR 30 2013. (11/18038-9)