Produção de fragmentos recombinantes de anticorpos a partir do cultivo de Pichia pastoris geneticamente modificada

• Processo: 12/50210-9
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2012
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2014
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Adalberto Pessoa Junior
• Beneficiário: Adalberto Pessoa Junior
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCF). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Fermentação Microbiologia industrial Leveduras Pichia pastoris
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Aeracao E Agitacao | Biomoleculas | Fermentacao | Leveduras | Microbiologia Industrial | Pichia Pastoris

Resumo

Este projeto tem a finalidade de estudar as variáveis que influenciam a produção do fragmento de anticorpo (scFv) por P. pastoris em agitador metabólico e em biorreatores de 3 e de 14 litros. Serão realizados estudos, alguns deles com auxílio de planejamento experimental, sobre a influência de variáveis relevantes na expressão do fragmento scFv do anticorpo por Pichia pastoris, como: concentração do inóculo; concentração do indutor, tempo e temperatura de indução; e fontes alternativas de carbono (com relações entre C:N na faixa de 4 a 14). As fontes alternativas de nitrogênio e carbono inicialmente testadas serão: extrato de farelo de arroz; extrato de farelo de soja e extrato de levedura. Outras fontes alternativas também poderão ser avaliadas. O parâmetro coeficiente volumétrico de transferência de oxigênio (kla), variável em função da velocidade de agitação e aeração do biorreator, será utilizado como critério para ampliação de escala do cultivo em biorreator de 3 para 14 litros e terá como objetivo proporcionar reprodutibilidade dos seguintes parâmetros: curvas de crescimento celular, produção do fragmento de anticorpo; consumo de substrato; produtividade em células e em fragmento scFv. (AU)

Publicações científicas

(9)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

ZEPEDA, ANDREA B.; FIGUEROA, CAROLINA A.; ABDALLA, DULCINEIA S. P.; MARANHAO, ANDREA Q.; ULLOA, PATRICIO H.; PESSOA, JR., ADALBERTO; FARIAS, JORGE G.. Biomarkers to evaluate the effects of temperature and methanol on recombinant Pichia pastoris. Brazilian Journal of Microbiology, v. 45, n. 2, p. 475-483, APR-JUN 2014. (12/50210-9)

RABERT, CLAUDIA; WEINACKER, DANIEL; PESSOA, JR., ADALBERTO; FARIAS, JORGE G.. Recombinants proteins for industrial uses: utilization of Pichia pastoris expression system. Brazilian Journal of Microbiology, v. 44, n. 2, p. 351-356, 2013. (12/50210-9)

FARIAS, JORGE G.; MOLINA, VICTOR M.; CARRASCO, RODRIGO A.; ZEPEDA, ANDREA B.; FIGUEROA, ELIAS; LETELIER, PABLO; CASTILLO, RODRIGO L.. Antioxidant Therapeutic Strategies for Cardiovascular Conditions Associated with Oxidative Stress. NUTRIENTS, v. 9, n. 9, SEP 2017. (12/50210-9)

ANDREA B. ZEPEDA; ADALBERTO PESSOA JR; JORGE G. FARÍAS. Carbon metabolism influenced for promoters and temperature used in the heterologous protein production using Pichia pastoris yeast. Brazilian Journal of Microbiology, v. 49, p. 119-127, 2018-00-00. (12/50210-9)

ZEPEDA, ANDREA B.; FIGUEROA, CAROLINA A.; PESSOA, ADALBERTO; FARIAS, JORGE G.. Free fatty acids reduce metabolic stress and favor a stable production of heterologous proteins in Pichia pastoris. Brazilian Journal of Microbiology, v. 49, n. 4, p. 856-864, OCT-DEC 2018. (12/50210-9)

ZEPEDA, ANDREA B.; PESSOA, JR., ADALBERTO; FARIAS, JORGE G.. Carbon metabolism influenced for promoters and temperature used in the heterologous protein production using Pichia pastoris yeast. Brazilian Journal of Microbiology, v. 49, n. 1, p. 119-127, 2018. (12/50210-9)

FARIAS, JORGE G.; HERRERA, EMILIO A.; CARRASCO-POZO, CATALINA; SOTOMAYOR-ZARATE, RAMON; CRUZ, GONZALO; MORALES, PAOLA; CASTILLO, RODRIGO L.. Pharmacological models and approaches for pathophysiological conditions associated with hypoxia and oxidative stress. PHARMACOLOGY & THERAPEUTICS, v. 158, p. 1-23, FEB 2016. (12/50210-9)

ANDREA B. ZEPEDA; CAROLINA A. FIGUEROA; DULCINEIA S.P. ABDALLA; ANDREA Q. MARANHÃO; PATRICIO H. ULLOA; ADALBERTO PESSOA JR.; JORGE G. FARÍAS. HSF-1, HIF-1and HSP90 expression on recombinant Pichia pastoris under fed-batch fermentation. Brazilian Journal of Microbiology, v. 45, n. 2, p. 485-490, 2014-06-00. (12/50210-9)

ZEPEDA, ANDREA B.; FIGUEROA, CAROLINA A.; ABDALLA, DULCINEIA S. P.; MARANHAO, ANDREA Q.; ULLOA, PATRICIA H.; PESSOA, JR., ADALBERTO; FARIAS, JORGE G.. HSF-1, HIF-1 and HSP90 expression on recombinant Pichia pas of is under fed-batch fermentation. Brazilian Journal of Microbiology, v. 45, n. 2, p. 485-490, APR-JUN 2014. (12/50210-9)

Patente(s) depositada(s) como resultado deste projeto de pesquisa