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Produção de fragmentos recombinantes de anticorpos a partir do cultivo de Pichia pastoris geneticamente modificada

Processo: 12/50210-9
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Regular
Vigência: 01 de julho de 2012 - 30 de junho de 2014
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
Pesquisador responsável:Adalberto Pessoa Junior
Beneficiário:Adalberto Pessoa Junior
Instituição-sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCF). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Fermentação  Microbiologia industrial  Leveduras  Pichia pastoris 

Resumo

Este projeto tem a finalidade de estudar as variáveis que influenciam a produção do fragmento de anticorpo (scFv) por P. pastoris em agitador metabólico e em biorreatores de 3 e de 14 litros. Serão realizados estudos, alguns deles com auxílio de planejamento experimental, sobre a influência de variáveis relevantes na expressão do fragmento scFv do anticorpo por Pichia pastoris, como: concentração do inóculo; concentração do indutor, tempo e temperatura de indução; e fontes alternativas de carbono (com relações entre C:N na faixa de 4 a 14). As fontes alternativas de nitrogênio e carbono inicialmente testadas serão: extrato de farelo de arroz; extrato de farelo de soja e extrato de levedura. Outras fontes alternativas também poderão ser avaliadas. O parâmetro coeficiente volumétrico de transferência de oxigênio (kla), variável em função da velocidade de agitação e aeração do biorreator, será utilizado como critério para ampliação de escala do cultivo em biorreator de 3 para 14 litros e terá como objetivo proporcionar reprodutibilidade dos seguintes parâmetros: curvas de crescimento celular, produção do fragmento de anticorpo; consumo de substrato; produtividade em células e em fragmento scFv. (AU)

Publicações científicas (9)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
ZEPEDA, ANDREA B.; FIGUEROA, CAROLINA A.; PESSOA, ADALBERTO; FARIAS, JORGE G. Free fatty acids reduce metabolic stress and favor a stable production of heterologous proteins in Pichia pastoris. Brazilian Journal of Microbiology, v. 49, n. 4, p. 856-864, OCT-DEC 2018. Citações Web of Science: 0.
ANDREA B. ZEPEDA; ADALBERTO PESSOA JR; JORGE G. FARÍAS. Carbon metabolism influenced for promoters and temperature used in the heterologous protein production using Pichia pastoris yeast. Brazilian Journal of Microbiology, v. 49, p. -, 2018.
ZEPEDA, ANDREA B.; PESSOA, JR., ADALBERTO; FARIAS, JORGE G. Carbon metabolism influenced for promoters and temperature used in the heterologous protein production using Pichia pastoris yeast. Brazilian Journal of Microbiology, v. 49, n. 1, p. 119-127, 2018. Citações Web of Science: 0.
FARIAS, JORGE G.; MOLINA, VICTOR M.; CARRASCO, RODRIGO A.; ZEPEDA, ANDREA B.; FIGUEROA, ELIAS; LETELIER, PABLO; CASTILLO, RODRIGO L. Antioxidant Therapeutic Strategies for Cardiovascular Conditions Associated with Oxidative Stress. NUTRIENTS, v. 9, n. 9 SEP 2017. Citações Web of Science: 29.
FARIAS, JORGE G.; HERRERA, EMILIO A.; CARRASCO-POZO, CATALINA; SOTOMAYOR-ZARATE, RAMON; CRUZ, GONZALO; MORALES, PAOLA; CASTILLO, RODRIGO L. Pharmacological models and approaches for pathophysiological conditions associated with hypoxia and oxidative stress. PHARMACOLOGY & THERAPEUTICS, v. 158, p. 1-23, FEB 2016. Citações Web of Science: 14.
ANDREA B. ZEPEDA; CAROLINA A. FIGUEROA; DULCINEIA S.P. ABDALLA; ANDREA Q. MARANHÃO; PATRICIO H. ULLOA; ADALBERTO PESSOA JR.; JORGE G. FARÍAS. HSF-1, HIF-1and HSP90 expression on recombinant Pichia pastoris under fed-batch fermentation. Brazilian Journal of Microbiology, v. 45, n. 2, p. -, Jun. 2014.
ZEPEDA, ANDREA B.; FIGUEROA, CAROLINA A.; ABDALLA, DULCINEIA S. P.; MARANHAO, ANDREA Q.; ULLOA, PATRICIO H.; PESSOA, JR., ADALBERTO; FARIAS, JORGE G. Biomarkers to evaluate the effects of temperature and methanol on recombinant Pichia pastoris. Brazilian Journal of Microbiology, v. 45, n. 2, p. 475-483, APR-JUN 2014. Citações Web of Science: 4.
ZEPEDA, ANDREA B.; FIGUEROA, CAROLINA A.; ABDALLA, DULCINEIA S. P.; MARANHAO, ANDREA Q.; ULLOA, PATRICIA H.; PESSOA, JR., ADALBERTO; FARIAS, JORGE G. HSF-1, HIF-1 and HSP90 expression on recombinant Pichia pas of is under fed-batch fermentation. Brazilian Journal of Microbiology, v. 45, n. 2, p. 485-490, APR-JUN 2014. Citações Web of Science: 7.
RABERT, CLAUDIA; WEINACKER, DANIEL; PESSOA, JR., ADALBERTO; FARIAS, JORGE G. Recombinants proteins for industrial uses: utilization of Pichia pastoris expression system. Brazilian Journal of Microbiology, v. 44, n. 2, p. 351-356, 2013. Citações Web of Science: 15.

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Patente(s) depositada(s) como resultado deste projeto de pesquisa

MÉTODO DE PRODUÇÃO DE FRAGMENTOS DE ANTICORPO POR PICHIA PASTORIS GENETICAMENTE MODIFICADA E MEIO DE CULTIVO SIMPLIFICADO BR1020140041060 - Universidade de Brasília (UNB) ; Universidade de São Paulo (USP) . Adalberto Pessoa Júnior; Andrea Queiroz Maranhão; Cesar Andres Diaz Arias; Daniela de Araujo Viana Marques; Dulcineia Saes Parra Abdalla; João Vitor Dutra Molino; Valker Arauo Feitosa - 21 de fevereiro de 2014

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