The Aspergillus fumigatus pkcA(G579R) Mutant is Defective in the Activation of the Cell Wall Integrity Pathway but is Dispensable for Virulence in a Neutropenic Mouse Infection Model

• Processo: 15/17805-7
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Publicações científicas - Artigo
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2015
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2016
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Iran Malavazi
• Beneficiário: Iran Malavazi
• Instituição Sede: Centro de Ciências Biológicas e da Saúde (CCBS). Universidade Federal de São Carlos (UFSCAR). São Carlos , SP, Brasil
• Assunto(s): Aspergillus fumigatus
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Aspergillus fumigatus | cell wall integrity | protein kinase C | micologia molecular

Resumo

Aspergillus fumigatus é fungo patógeno oportunista em humano, causador da, aspergilose pulmonar invasiva, a forma mais grave das infeções causadas por esse organismo. Em fungos, homeostase da parede celular é controlada pela via integridade da parede celular (CWI). Em A. fumigatus esta cascata de sinalização é parcialmente caracterizadas, porém os mecanismos pelos quais ela é ativada não estão totalmente elucidados. Neste estudo, investigamos o papel da proteína quinase C (PkcA) nesta cascata de sinalização. Nossos resultados sugerem que pkcA é um gene essencial e é ativado em resposta ao estresse de parede celular. Posteriormente, foi construído e analisado um mutante não-essencial de PkcA denominado pkcAG579R em A. fumigatus o qual contém uma substituição Gly579Arg no domínio regulatório C1B da proteína. A mutação pkcAG579R resulta em reduzida ativação da MAPK MpkA, resultando na expressão alterada de genes que codificam proteínas relacionadas com a síntese de parede celular, marcadores de estresse de retículo endoplasmático e mau enovelamento de proteína. Além disso, PkcAG579R está envolvida na formação correta da arquitetura de conídios e proteção ao dano oxidativo. O mutante pkcAG579R provoca o aumento da produção de TNF-± e das taxas de fagocitose, porém não apresenta nenhum impacto sobre a virulência em modelo murino de aspergilose pulmonar invasiva. Estes resultados realçam a importância de PkcA na via da integridade da parede celular, mas também indicam que circuitos reguladores adicionais podem estar envolvidos no controle da biossíntese e/ou do reforço da parede celular de A. fumigatus durante a infecção. (AU)