Otimização e aumento de escala de processos com líquidos iônicos como nova ferramenta de purificação da proteína verde fluorescente recombinante produzida por Escherichia coli "GFPurIL"

• Processo: 14/19793-3
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2015
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2019
• Área do conhecimento: Engenharias - Engenharia Química - Tecnologia Química
• Acordo de Cooperação: Fundação para a Ciência e a Tecnologia (FCT)
• Pesquisador responsável: Sandro Roberto Valentini
• Beneficiário: Sandro Roberto Valentini
• Pesquisador Responsável no exterior: João Manuel da Costa e Araújo Pereira Coutinho
• Instituição Parceira no exterior: Universidade de Aveiro (UA), Portugal
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCFAR). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Adalberto Pessoa Junior ; Jorge Pereira ; Mara Guadalupe Freire Martins ; Sónia Patrícia Marques Ventura ; Valéria de Carvalho Santos Ebinuma
• Assunto(s): Extração líquido-líquido Líquidos iônicos Biomarcadores Proteínas de fluorescência verde Purificação de proteínas Escherichia coli
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Aqueous Two-Phase Systems | Biomarker Proteins | Green Fluorescent Protein | ionic liquids | Liquid-liquid Extraction | Purification | Engenharia de Bioprocessos

Resumo

As indústrias Farmacêutica e Biotecnológica têm como novos desafios a utilização de proteínas como terapêuticas inovadoras e vitais para o tratamento de doenças bastante complexas. Contudo, o controlo da sua produção e/ou identificação de sua aplicabilidade e eficácia requer um desenvolvimento de novas biomarcadores e bionsensores. Desse modo, a facilidade deteção da Proteína Verde Fluorescente (GFP) levou a que a mesma se tenha tornado um dos biomarcadores biológicos mais promissores. Contudo, tal como as outras proteínas/enzimas produzidas por microorganismos, a sua produção e purificação é bastante complexa e extremamente dispendiosa, o que limita uma larga utilização da GFP. Assim, este projeto propõe como metodologia alternativa e mais sustentável o uso de Sistemas de Duas Fases Aquosas com Líquidos Iônicos (IL-ATPS) na purificação e isolamento da GFP recombinante produzida por Escherichia coli. De forma a atingir este objectivo, este projeto irá começar com a expressão e produção da GFP, e posteriormente a optimização da sua purificação a partir dos meios fermentados utilizando quatro abordagens diferentes de IL-ATPS. Então, será realizado o respetivo aumento de escala dos sistemas de purificação optimizados em escala laboratorial para uma escala piloto. Sumariando, com este projeto pretende-se desenvolver e estudar a aplicabilidade industrial de uma nova tecnologia de downstream para a produção de GFP, a qual poderá ser depois aplicada para outras proteínas e bioprodutos de valor acrescentado. (AU)

Publicações científicas

(18)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

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