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Analise genetica do receptor relacionado com respostas a ecdisteroides no desenvolvimento pos-embrionario de apis mellifera.

Processo: 00/05086-0
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado
Vigência (Início): 01 de setembro de 2000
Vigência (Término): 31 de agosto de 2004
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Morfologia - Citologia e Biologia Celular
Pesquisador responsável:Zilá Luz Paulino Simões
Beneficiário:Angel Roberto Barchuk
Instituição-sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:99/00719-6 - Abelhas africanizadas: análise integrada do processo de africanização de Apis mellifera com foco sobre determinantes da fertilidade de zangões, rainhas e operárias, AP.TEM
Assunto(s):Apis mellifica   Peixes   Expressão gênica

Resumo

Nos propomos construir uma biblioteca de cDNA de imagos faratos de operárias de Apis mellifera, identificar e seqüenciar o cDNA correspondente ao receptor com resposta aos ecdisteróides (AmEcR), determinar o padrão de expressão de seu transcrito durante o desenvolvimento pós-embrionário, determinar o número possível de cópias deste gene e identificar a sua localização cariotípica. As primeiras atividades a desenvolver-se serão as relativas à construção da biblioteca de cDNA. Uma vez completada a biblioteca e utilizando sondas marcadas (obtidas por PCR de seqüências conservadas dos receptores de outros insetos) serão localizados os clones correspondentes ao cDNA do AmEcR putativo. Posteriormente se procederá ao seqüenciamento do mesmo, sua avaliação e comparação com seqüências já conhecidas. O estudo do padrão de expressão do gene no desenvolvimento pós-embrionário será feito mediante Northern blots. Seus resultados serão avaliados em relação aos perfis de ecdisteróides da hemolinfa. Para a determinação do número possível de cópias do gene, será extraído DNA genômico, tratado com enzimas de restrição e avaliado por Southern blot. A identificação do cromossomo portador do gene será feita por hibridação fluorescente in situ mediante complexo biotina-antibiotina-FITC (FISH) em preparações meióticas de testículos de zangões. (AU)

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