Participacao da proteina cinase mtor (mammalian target of rapamycin) e do fator transcricional nf-kb na regulacao da expressao do glut4 em musculo soleo de ratos.

• Processo: 07/57873-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2008
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2011
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia
• Pesquisador responsável: Ubiratan Fabres Machado
• Beneficiário: Paulo Alexandre de Carvalho Moraes
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): NF-kappa B Transportador de glucose tipo 4 Serina-treonina quinases TOR Insulina
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Glut4 | Insulina | Mtor | Nf-Kb | Soleo

Resumo

É possível que a insulina seja um importante regulador da expressão do gene do GLUT4, entretanto, in vivo, as inúmeras alterações metabólico-hormonais que induz não permitiram, até o momento, que se defina claramente esse papel da insulina. O isolamento das variáveis metabólico-hormonais, in vitro, é um caminho para se buscar determinar os efeitos I diretos da insulina na regulação do gene do GLUT4. Sabendo que a insulina estimula a via mitogênica, na qual a proteína cinase mTOR (mammalian target of rapamycin) desempenha papel chave, e a partir de estudos anteriores evidenciando uma modulação do fator transcricional NF-kB (Nuclear Factor -kappa B), o objetivo desta pesquisa é investigar a participação da mTOR e do NF-kB na regulação da insulina sobre a expressão do GLUT4 em músculo sóleo de ratos, in vitro. Para isso, músculos sóleos de ratos serão incubados (60, 120 e 180 minutos) em tampão Krebs-Henseleit, suplementado ou não com glicose (5.6 mM), insulina regular (16.7 nM), wortmannin (inibidor da phosphatidylinositol-3 kinase, 1 uM) e rapamycin (inibidor da mTOR, 25 nM). Nestes tecidos será avaliado: o conteúdo de mRNA e proteína GLUT4 (Northern e Western), o conteúdo de mRNA do NF-KB (PCR), atividade de ligação de proteínas nucleares no sítio de ligação do NF-KB do promotor do GLUT4 (Electroforetic Mobility Shift Assay - EMSA), e a participação das isoformas de NF-KB p50 e ReIA (supershift). Espera-se determinar mecanismos específicos da insulina na regulação do GLUT4, o que deverá contribuir para estabelecer medidas de regulação da expressão desse gene. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

MORAES, PAULO ALEXANDRE; YONAMINE, CAIO YOGI; PINTO JUNIOR, DANILO CORREA; DELCONTI ESTEVES, JOAO VICTOR; MACHADO, UBIRATAN FABRES; MORI, ROSANA CRISTINA. Insulin acutely triggers transcription of Slc2a4 gene: Participation of the AT-rich, E-box and NFKB-binding sites. Life Sciences, v. 114, n. 1, p. 36-44, SEP 26 2014. (12/04831-1, 07/57873-5)

CARVALHO MORAES, PAULO ALEXANDRE; MACHADO, UBIRATAN FABRES. Short-Term Effect of Insulin on GLUT4 Expression in Soleus Muscle. Diabetes, v. 60, p. 1-pg., 2011-07-01. (07/57873-5)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

MORAES, Paulo Alexandre de Carvalho. A participação da proteína cinase mTOR (mammalian target of rapamycin) e do fator transcricional NF-kB na regulação da expressão do GLUT4 em músculo sóleo de ratos.. 2012. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Instituto de Ciências Biomédicas (ICB/SDI) São Paulo.