Mecanismo de solubilização das novas isoformas da enzima conversora de angiotensina I: liberação proteolítica (secretases) ou splicing alternativo do RNAm

• Processo: 08/55771-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2008
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2012
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Dulce Elena Casarini
• Beneficiário: Danielle Sanches Aragão
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 02/13290-2 - Isoforma (90 kDa) da enzima conversora de Angiotensina I, potencial marcador genético de hipertensão: processamento, caracterização molecular e funcional, e segregação genética, AP.TEM
• Assunto(s): Hipertensão Solubilização Isoformas de proteínas Enzima conversora de angiotensina Cultura de células Células mesangiais
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Celula Mesanglais | Eca | Hipertensao | Isoformas | Solubilizacao | Spling Alternativo Do Rnam

Resumo

A Enzima Conversora de Angiotensina I (ECA) é uma zincometaloprotease com ação importante na patogênese das várias doenças cardiovasculares. Em estudos de nosso grupo verificou-se um perfil diferente de isoformas da ECA nas urinas de ratos e/ou indivíduos normotensos quando comparados a ratos e/ou indivíduos hipertensos, nos quais foi detectada uma isoforma N-domínio de 90/80 kDa. Esta isoforma é um possível marcador genético de hipertensão, a qual é segregada. O mesmo perfil encontrado nas urinas se repete nas células mesangiais e nos tecidos de ratos Wistar (normotensos) e SHR (hipertensos). Além desta isoforma de 90/80 kDa, uma outra isoforma da ECA N-domínio de 65 kDa foi também descrita. Sugere-se que mecanismos de solubilização da ECA somática possam estar envolvidos na formação destas isoformas por liberação proteolítica com envolvimento de uma secretase ou por splicing alternativo do RNAm. O objetivo deste trabalho, será verificar a origem destas novas isoformas. Para este estudo, utilizaremos cultura de células mesangiais primárias de ratos Wistar e SHR, verificando primeiramente a existência de uma ou mais secretases através da utilização de substratos fluoro gênicos e com posterior caracterização bioquímica e molecular da enzima. Paralelamente investigaremos a existência de RNAm que codifique para essas novas isoformas, utilizando inicialmente técnicas de PCR e análise de bioinformática. Este estudo poderá esclarecer se as diferenças encontradas entre indivíduos (e/ou ratos) normais e hipertensos se devem ao gene da própria ECA ou se existiria uma outra enzima que por sua vez estaria sendo regulada por um gene relacionado à hipertensão. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

ARAGAO, DANIELLE S.; DE ANDRADE, MARIA CLAUDINA C.; EBIHARA, FABIANA; WATANABE, INGRID K. M.; MAGALHAES, DAYANE C. B. P.; JULIANO, MARIA APARECIDA; HIRATA, IZAURA YOSHICO; CASARINI, DULCE ELENA. Serine proteases as candidates for proteolytic processing of angiotensin-I converting enzyme. International Journal of Biological Macromolecules, v. 72, p. 673-679, JAN 2015. (08/55771-3, 10/51904-9)