Estudo de duas proteínas de membrana de Leptospira interrogans expressas no hospedeiro Escherichia coli

• Processo: 10/12639-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2011
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2012
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Ana Lucia Tabet Oller do Nascimento
• Beneficiário: Gabriela Hase Siqueira
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Proteínas da membrana Proteínas recombinantes Leptospirose Leptospira interrogans Escherichia coli
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Leptospira | leptospirose | proteína recombinante | Biologia Molecular Aplicada a Biotecnologia

Resumo

Leptospirose é uma zoonose altamente disseminada causada por espécies patogênicas do gênero Leptospira (Levett, 2001). Os roedores são os principais reservatórios da doença nos centros urbanos. Anualmente, são relatados a Fundação Nacional de Saúde (FUNASA/MS) cerca de 5000 casos, os quais ocorrem como surtos epidêmicos nas épocas de chuva. O desenvolvimento de uma vacina é crítico, uma vez que a contenção da proliferação de roedores é pouco viável e não há vacina licenciada para uso humano. Buscando obter proteínas antigênicas e conservadas nos diversos sorovares de Leptospira interrogans, estudos atuais têm buscado caracterizar e identificar as proteínas de superfície capazes de induzir atividade imunogênica no hospedeiro. O presente projeto propõe clonar e expressar 2 proteínas de membrana externa. Os genes selecionados, LIC11975 e LIC13477, serão clonados em vetor de expressão de E. coli, as proteínas recombinantes serão purificadas por cromatografia de afinidade a metal e inoculadas em camundongos para avaliação da atividade imunogênica e obtenção de soros imunes. Estes soros serão utilizados como sonda para avaliar o reconhecimento dos anticorpos por proteínas do extrato total de Leptospira spp de diferentes sorovares para estudarmos sua conservação. As proteínas presentes em diferentes leptospiras patogênicas serão avaliadas quanto à reatividade com anticorpos em soros de pacientes diagnosticados com a doença. (AU)