Modulação da proteína transportadora de glicose glut4 pelo receptor canabinóide cb1 em células musculares l6

• Processo: 11/05715-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2011
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2012
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Daniela Tomie Furuya
• Beneficiário: Laís Ribeiro Hinz
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Sistema musculoesquelético Músculo esquelético Transportador de glucose tipo 4 Endocrinologia Obesidade
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: endocanabinóide | Glut4 | Músculo esquelético | obesidade | Endocrinologia

Resumo

Na obesidade, o sistema endocanabinóide encontra-se hiper ativado, o que resulta em aumento dos níveis de endocanabinóides circulantes. O receptor canabinóide CB1 além de ser expresso no cérebro, é encontrado em tecido adiposo e músculo esquelético. Raros estudos apontam diferentes efeitos da ativação do sistema endocanabinóide sobre a captação da glicose em diferentes tecidos. Adicionalmente, recentes estudos in vitro obtidos em nosso laboratório demonstram que a inibição do receptor CB1 resulta em aumento expressivo do mRNA e da proteína GLUT4 em adipócitos. No entanto, em músculo esquelético, nada se conhece a respeito da modulação da expressão de GLUT4 pelo receptor CB1, e nem dos possíveis fatores de transcrição envolvidos. O presente projeto tem como objetivo verificar a modulação pelo receptor canabinóide CB1 na expressão de GLUT4, bem como o envolvimento do fator de transcrição SREBP-1, em cultura de células musculares. Para tanto, células musculares da linhagem L6 serão tratadas por 2 ou 4 horas com agonista seletivo do receptor CB1 (0,5 µM de ACEA), e/ou antagonista seletivo do receptor CB1 (0,5 µM AM251) e posteriormente, submetidas às seguintes análises: (1) expressão do mRNA de GLUT4, por PCR em tempo real (2) expressão da proteína GLUT4, por Western blotting, (3) ligação de SREBP-1 na região promotora do gene que expressa GLUT4, por Ensaio de Mobilidade Eletroforética (EMSA).