Determinação do comprimento telomérico em leucócitos do sangue periférico em indivíduos normais: variação com a idade.

• Processo: 11/11485-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2011
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2011
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Eduardo Magalhães Rego
• Beneficiário: Natalia Ferreira Scatena
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 98/14247-6 - Center for Research on Cell-Based Therapy, AP.CEPID
• Assunto(s): Envelhecimento Cirrose hepática Anemia aplástica Telômero Hematologia Telomerase
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: anemia aplástica | cirrose | Envelhecimento | telomerase | telômero | Hematologia

Resumo

Os telômeros são estruturas ribonucleoprotêicas nas extremidades dos cromossomos lineares que servem para proteger os cromossomos de fusão por recombinação homóloga ou não-homóloga e instabilidade. Devido à incapacidade da DNA polimerase de deplicar completamente as extremidades da dupla fita de DNA linear, a fita simples recém-sintetizada é mais curta que a fita molde. Desta maneira, os telômeros se encurtam a cada divisão celular mitótica. Para manter o comprimento telomérico, células com alta capacidade proliferativa expressam a telomerase, uma transcriptase reversa que adiciona cataliticamente hexâmeros TTAGGG à extremidade 5´ da fitalíder do telômero. Entretanto, apesar da expressão da telomerase, células humanas demonstram encurtamento telomérico com a idade. Ademais, mutações nos genes que codificam componentes da telomerase causam encurtamento telomérico excessivo, que clinicamente se traduz em anemia aplástica, leucemia mielóide aguda, fibrose pulmonar idiopática, cirrose hepática e hiperplasia nodular regenerativa do fígado. O objetivo deste projeto é estabelecer um novo método de medição do comprimento telomérico de células humanas usando PCR quantitativo monocrômico em multiplex (Cawthon, NAS 2009) e determinar a variação com a idade na população brasileira. O método envolve um aprimoramento da técnica anteriormente publicada (Cawthon NAS 2009), com uso de equipamento em disco e rotador e não em placa, o que confere maior rapidez e homogeneidade aos resultados. Nossos resultados preliminares mostram que este novo meetodo apresenta correlação mais estreita com a medidad e comprimento telomérico por Southern blot em comparação ao método previamente descrito por Cawthon.