Isolamento, caracterização bioquímica e funcional de L - aminoácido - oxidase do veneno amarelo da serpente Crotalus durissus terrificus

• Processo: 12/02839-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2012
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2012
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Química de Macromoléculas
• Pesquisador responsável: Maurício Ventura Mazzi
• Beneficiário: Ariana Aparecida Pianca
• Instituição Sede: Pró-Reitoria de Pós-Graduação e Pesquisa. Centro Universitário Hermínio Ometto (UNIARARAS). Fundação Hermínio Ometto (FHO). Araras , SP, Brasil
• Assunto(s): Inflamação Coagulação Citotoxicidade Cromatografia Propriedades bioquímicas Crotalus durissus terrificus
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: coagulação | Crotalus durissus terrificus | Inflamação | L-aminoácido-oxidadese | Isolamento e Caracaterização Bioquímica

Resumo

Toxinas encontradas em animais peçonhentos e venenosos têm sido o foco de muitas pesquisas nos últimos 70 anos, sendo a maioria delas direcionadas para a compreensão dos mecanismos fisiológicos e bioquímicos pelos quais conseguem desencadear seus dramáticos efeitos patológicos. O veneno crotálico é constituído, abundantemente, por enzimas e peptídeos que apresentam efeitos importantes sobre os músculos esqueléticos, sistema nervoso, rins e sistema de coagulação sanguínea. As L-aminoácido oxidases (LAAOs, E.C. 1.4.3.2) são flavoproteínas homodiméricas encontradas em venenos de serpentes e descritas como indutoras de uma série de efeitos tóxicos, tais como, agregação plaquetária, hemorragia, edema, citotoxicidade e indução de apoptose, dentre outros efeitos. Assim, o objetivo deste projeto é isolar, caracterizar, bioquímica e funcionalmente uma L-aminoácido oxidase de veneno amarelo da espécie de serpente Crotalus durissus terrificus. A enzima será isolada por meio de técnicas cromatográficas (exclusão molecular, troca iônica e afinidade) de acordo com protocolos a serem padronizados. A LAAOcdt isolada será caracterizada quanto: I)-propriedades bioquímicas e enzimáticas (determinação da massa molecular, caracterização cinética em função do pH, temperatura e concentração de diferentes substratos: L-Tyr, L-Asp, L-Phe, L-Glu, L-Trp, L-His, L-Gln, L-Ile, L-Met, L-Leu) e II)-biológicas (efeitos miotóxico, necrosante e pró e/ou anticoagulante).(AU)