Desenvolvimento de técnicas de RT-PCR em tempo real para arbovírus causadores de doença humana e identificação destes com base na sequência nucleotídica

• Processo: 12/02836-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2012
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2014
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Luiz Tadeu Moraes Figueiredo
• Beneficiário: Marilia Farignoli Romeiro
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Phlebovirus Reação em cadeia da polimerase em tempo real Alphavirus Orthobunyavirus Flavivirus
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Alphavirus | flavivírus | Orthobunyavirus | Phlebovírus | RT-PCR em tempo real | seqüenciamento nucleotídico | Investigação Biomédica

Resumo

Os arbovírus relacionados as famílias Flaviviridae, Togaviridae e Bunyaviridae compreendem graves problemas de saúde pública em países tropicais e subtropicais. Estas arboviroses geralmente sub-diagnosticadas, envolvem manifestações clínicas que vão de infecção assintomática, doença febril aguda a febre hemorrágica viral e encefalites. Os arbovírus são mantidos na natureza através de ciclo que compreendem hospedeiros naturais (amplificadores) que são as aves, mamíferos e alguns répteis, e como vetores, mosquitos do gênero Aedes sp., Culex sp., Sabethes sp. e Psorophora sp., que por vezes estes podem transmitir estas viroses aos hospedeiros acidentais como os seres humanos, equinos e outros mamíferos. As metodologias empregadas no diagnóstico das infecções por arbovírus têm como base testes sorológicos, como o ELISA, e virológicos. Com o advento das técnicas moleculares, a reação em cadeia da polimerase (PCR) tem sido largamente empregado no diagnostico das infecções por arbovírus. A técnica de RT-PCR em tempo real provém vantagens sobre a técnica de PCR convencional por apresentar rapidez, alta sensibilidade e especificidade, ainda permite a quantificação da carga viral das amostras, sendo importante para estudar a patogênese destas arboviroses. O presente estudo objetiva o desenvolvimento de uma técnica de RT-PCR em tempo real utilizando SYBR Green para detecção de arbovírus causadores de doença humana e investigar após o seqüenciamento nucleotídico a possível presença de Flavivirus, Alphavirus, Phlebovirus e Orthobunyavirus nas amostras analisadas.

Publicações científicas

(5)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

ROMEIRO, MARILIA FARIGNOLI; DE SOUZA, WILLIAM MARCIEL; TOLARDO, ALINE LAVADO; VIEIRA, LUIZ CARLOS; HENRIQUES, DYANA ALVES; DE ARAUJO, JANSEN; HASSEGAWA SIQUEIRA, CARLOS EDUARDO; COLOMBO, TATIANA ELIAS; AQUINO, VICTOR HUGO; LOPES DA FONSECA, BENEDITO ANTONIO; et al. A real-time RT-PCR for rapid detection and quantification of mosquito-borne alphaviruses. ARCHIVES OF VIROLOGY, v. 161, n. 11, p. 3171-3177, NOV 2016. (13/02256-2, 12/02836-6, 13/14929-1, 12/24150-9, 14/15079-4, 14/20851-8)

SILVA, JAQUELINE RAYMONDI; ROMEIRO, MARILIA FARIGNOLI; DE SOUZA, WILLIAM MARCIEL; MUNHOZ, THIAGO DEMARCHI; BORGES, GUSTAVO PUIA; BRIOSCHI SOARES, OTAVIO AUGUSTO; COELHO DE CAMPOS, CARLOS HENRIQUE; MACHADO, ROSANGELA ZACARIAS; CRISTINY RODRIGUES SILVA, MARIA LUANA; MAIA FARIA, JOICE LARA; et al. A Saint Louis encephalitis and Rocio virus serosurvey in Brazilian horses. Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical, v. 47, n. 4, p. 414-417, JUL-AUG 2014. (08/50617-6, 08/52685-9, 12/02836-6, 12/24150-9)

ALINE LAVADO TOLARDO; WILLIAM MARCIEL DE SOUZA; MARILIA FARIGNOLI ROMEIRO; LUIZ CARLOS VIEIRA; LUCIANO KLEBER DE SOUZA LUNA; DYANA ALVES HENRIQUES; JANSEN DE ARAUJO; CARLOS EDUARDO HASSEGAWA SIQUEIRA; TATIANA ELIAS COLOMBO; VICTOR HUGO AQUINO; et al. A real-time reverse transcriptase polymerase chain reaction for detection and quantification of Vesiculovirus. Memórias do Instituto Oswaldo Cruz, v. 111, n. 6, p. 385-390, 2016-06-03. (13/02256-2, 13/14929-1, 12/02836-6, 14/15079-4, 12/24150-9)

MOTTA MAIA, FELIPE GONCALVES; CHAVEZ, JULIANA HELENA; DE SOUZA, WILLIAM MARCIEL; ROMEIRO, MARILIA FARIGNOLI; DE CASTRO-JORGE, LUIZA ANTUNES; LOPES DA FONSECA, BENEDITO ANTONIO; MORAES FIGUEIREDO, LUIZ TADEU. Infection with Saint Louis encephalitis virus in the city of Ribeirao Preto, Brazil: report of one case. INTERNATIONAL JOURNAL OF INFECTIOUS DISEASES, v. 26, p. 96-97, SEP 2014. (08/50617-6, 06/01179-0, 12/02836-6, 12/24150-9)

ROMEIRO, MARILIA FARIGNOLI; DE SOUZA, WILLIAM MARCIEL; TOLARDO, ALINE LAVADO; VIEIRA, LUIZ CARLOS; COLOMBO, TATIANA ELIAS; AQUINO, VICTOR HUGO; NOGUEIRA, MAURICIO LACERDA; MORAES FIGUEIREDO, LUIZ TADEU. Evaluation and optimization of SYBR Green real-time reverse transcription polymerase chain reaction as a tool for diagnosis of the Flavivirus genus in Brazil. Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical, v. 49, n. 3, p. 279-285, MAY-JUN 2016. (13/02256-2, 12/02836-6, 14/20851-8, 12/24150-9, 13/14929-1, 14/15079-4)