Isolamento de tecidos embrionários para a análise de ChIP-seq e caracterização da expressão gênica por imuno-histoquímica

• Processo: 13/07164-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2013
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2014
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Embriologia
• Pesquisador responsável: Henrique Marques Barbosa de Souza
• Beneficiário: Cyro von Zuben de Valega Negrão
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 12/09602-0 - Caracterização da rede de regulação cardiogênica controlada por Coup-TFII a partir de células-tronco embrionárias, AP.JP
• Assunto(s): Expressão gênica Embriogênese Caracterização genética Reação em cadeia da polimerase via transcriptase reversa quantitativa (qRT-PCR) Imuno-histoquímica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: ChIP-seq | embriogenese | imuno-histoquímica | Expressão gênica

Resumo

A presente proposta de projeto de pesquisa visa a caracterização da rede de regulação gênica controlada pelo fator de transcrição Coup-TFII durante o desenvolvimento cardíaco. Visando uma maior flexibilidade técnica, está sendo aqui proposto a análise desta rede de regulação gênica em cardiomiócitos derivados de células-tronco embrionárias. Entretanto, apreciamos a necessidade de se traçar um paralelo entre os resultados obtidos para os cardiomiócitos derivados a partir de CTE e o desenvolvimento embrionário. Para isso, a análise de ChIP-seq para Coup-TFII será também realizada em tecido cardíaco de embriões de camundongos em diferentes estágios do desenvolvimento. Além disso, a proposta envolve a análise de expressão gênica, pela técnica de PCR quantitativo (qPCR), que será realizada através do isolamento de diferentes tecidos embrionários. Como uma forma de acrescer maiores detalhes ao conjunto de informações envolvendo o papel crucial de Coup-TFII durante o desenvolvimento, o padrão de expressão de Coup-TFII será caracterizado por imuno-histoquímica durante diferentes estágios do desenvolvimento embrionário.(AU)