Avaliação do potencial de crescimento e produção de proteínas recombinantes de células humanas adaptadas para crescimento em suspensão e meios de cultura livres de soro fetal bovino

• Processo: 14/01404-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2014
• Data de Término da vigência: 05 de outubro de 2018
• Área de conhecimento: Engenharias - Engenharia Química - Processos Industriais de Engenharia Química
• Pesquisador responsável: Kamilla Swiech Antonietto
• Beneficiário: Rafael Tagé Biaggio
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 12/04629-8 - Estabelecimento de uma plataforma de produção de proteínas recombinantes terapêuticas em células humanas, AP.JP
• Bolsa(s) vinculada(s): 15/10675-0 - Expressão estável e transiente do fator VII da coagulação em células humanas adaptadas para crescimento em suspensão e meios livres de soro fetal bovino, BE.EP.DR
• Assunto(s): Proteínas recombinantes Processos biotecnológicos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: células humanas | Crescimento em suspensão | Fator VII da coagulação | Meios Livres de Soro Fetal Bovino | Proteinas recombinantes | Processos Biotecnológicos

Resumo

A maioria das proteínas recombinantes terapêuticas (biofármacos) vem sendo expressas em células de mamíferos, pois este sistema é capaz de realizar modificações pós-traducionais bem como o enovelamento de proteínas de uma maneira autêntica, gerando uma proteína com correta qualidade terapêutica. Em função da crescente demanda por estes produtos e do alto custo e complexidade dos atuais processo de produção, a indústria tem buscado o desenvolvimento de processos otimizados, capazes de gerar uma proteína com alta produtividade e qualidade terapêutica. Linhagens celulares humanas têm despertado muito interesse pelo fato de serem capazes de produzir proteínas glicosiladas de maneira mais similar às proteínas nativas humanas, evitando possíveis respostas imunogênicas. Por terem um desenvolvimento recente, ainda não foram apropriadamente caracterizadas do ponto de vista de uma futura aplicação comercial. Frente ao exposto, o objetivo principal deste projeto é avaliar o potencial de crescimento e de produção de proteínas recombinantes das células humanas SK-Hep-1, HKB-11 e Huh-7 adaptadas para crescimento em suspensão em meios de cultura livres de soro fetal bovino (SFB) com o intuito de estabelecer uma plataforma de produção de proteínas recombinantes terapêuticas baseada em células humanas promissoras. Para isso, as células SK-Hep-1 e HKB-11 previamente adaptadas e a célula Huh-7, que será adaptada para crescimento em suspensão e meios livres de SFB, serão cultivadas em biorreatores em condições de cultivo representativas da escala industrial. Nestes cultivos serão analisados os parâmetros cinéticos de crescimento e o metabolismo das células. Além disso, será realizada uma análise proteômica comparativa entre as células adaptadas e as não adaptadas buscando um melhor entendimento do mecanismo de adaptação celular. Também será avaliado o potencial de produção da proteína recombinante Fator VII da coagulação (FVII) nas mesmas linhagens adaptadas. Os resultados obtidos serão comparados com o crescimento e a produção de proteína recombinante (FVII) na linhagem comercial HEK293 também adaptada para crescimento em suspensão e meio livre de SFB.

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

BIAGGIO, Rafael Tagé. Avaliação do potencial de crescimento e produção de proteínas recombinantes de células humanas adaptadas para crescimento em suspensão e meios de cultura livres de soro fetal bovino. 2018. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (PCARP/BC) Ribeirão Preto.