Caracterização da expressão gênica do gene gcsA e localização celular da proteína GcsA::GFP no fungo patogênico Aspergillus fumigatus

• Processo: 13/24358-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2014
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2016
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Farmácia
• Pesquisador responsável: Marcia Regina von Zeska Kress
• Beneficiário: Raquel Santos da Silva
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Genética Expressão gênica Membrana celular Suscetibilidade Caracterização genética Reação em cadeia por polimerase (PCR) Aspergillus fumigatus
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Arf-Gap | Esfingolipídio | gcsA::GFP | Protéina GcsA::GFP | Genética

Resumo

As proteinas ADP-ribosylation factor (ARF) - GTPase-activating proteins (GAPs) pertencem a uma família de proteínas que induzem a hidrólise de GTP ligado a ARF. O substrato ARF-GTP é a forma ativa e se liga a proteínas que recobrem vesículas de transporte, permitindo a sua formação. Assim, membros da família ARF são responsáveis pela biogênese de vesículas do trafego intracelular. Em Candida albicans o gene age3 que codifica uma proteína com domínio ARF-GAP, é requerido para o enlongamento da hifa e susceptibilidade a antifúngicos. gcsA, o ortologo de age3 no fungo filamentoso Aspergillus fumigatus, demonstra ser importante para a resposta a drogas que atuam na via dos esfingolipídios o qual é um dos principais componentes da membrana celular fúngica. Assim, a proposta do presente projeto é a localização da proteína gcsA mediante a construção de linhagens gcsA::GFP em A. fumigatus e a caracterização da expressão gênica do referido gene por PCR quantitativo em linhagem selvagem de A. fumigatus na presença de diferentes antifúngicos e drogas que atuam na via dos esfingolipídios.