Identificação de genes que codificam translocadores de fosfolipídeos em Leishmania

• Processo: 14/17542-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2014
• Data de Término da vigência: 27 de setembro de 2017
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Parasitologia - Protozoologia de Parasitos
• Pesquisador responsável: Lucile Maria Floeter-Winter
• Beneficiário: Carolina de Lima Jorge
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Fosfolipídeos Membrana plasmática Macrófagos Leishmania Apoptose Lipossomos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: apoptose | Fosfolipídeos | lipossomos | Transportadores | Protozoologia

Resumo

Os protozoários do gênero Leishmania possuem estratégias de escape da resposta imune do hospedeiro vertebrado. Foi proposto que a Leishmania utiliza a estratégia conhecida como mimetismo apoptótico, favorecendo uma entrada silenciosa no macrófago do hospedeiro vertebrado. No presente projeto pretendemos entender como ocorrem os arranjos de fosfolipídeos presentes nas duas camadas da membrana plasmática do parasita, que possam levar o macrófago do hospedeiro a entender o parasita como uma célula em apoptose. Para alcançar os objetivos vamos desenvolver mutantes de L. (L.) amazonensis, superexpressando o gene candidato à regulador e translocador de fosfolipídeos. Os mutantes serão analisados quanto a sua capacidade de ligação à anexina V em citometria de fluxo e microscópio de fluorescência. As propriedades de translocação de lipídeos dos mutantes serão analisadas com sondas de fosfolipídeos fluorescentes. Esses ensaios poderão contribuir para um melhor entendimento de como o parasita controla a sua distribuição lipídica entre as membranas. Para identificar o fosfolipideo que se liga à anexina-V, e que, portanto, se liga ao macrófago para que a Leishmania seja fagocitada, serão realizados ensaios de competição entre L. (L.) amazonensis selvagem e lipossomas contendo um fosfolipídeo específico nas concentrações de 0.2 µM, 20 µM ou 2 mM, na presença de macrófagos da linhagem RAW. Os ensaios serão realizados em 4 e 24h. (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

JORGE, Carolina de Lima. Identificação de genes que codificam translocadores de fosfolipídios em Leishmania. 2017. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Instituto de Medicina Tropical de São Paulo (IMT) São Paulo.