Cicatrização de feridas em camundongos FAT-1: envolvimento da via anti-inflamatória colinérgica

• Processo: 16/02021-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2016
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2017
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia Geral
• Pesquisador responsável: Hosana Gomes Rodrigues
• Beneficiário: Thamiris Candreva Robles
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Aplicadas (FCA). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Limeira , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 13/06810-4 - Mecanismos de ação dos ácidos graxos ômega-3 e ômega-6 no processo de reparo tecidual: enfoque neuro-imunológico, AP.JP
• Bolsa(s) vinculada(s): 16/23298-3 - Análise da composição da fração lipídica fosfatidilcolina em animais fat-1 no contexto da cicatrização de feridas, BE.EP.MS
• Assunto(s): Ácidos graxos Cicatrização Citocinas Fisiologia da pele Acetilcolina
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: acetilcolina | ácidos graxos | cicatrização | citocinas | Fisiologia da pele

Resumo

A inflamação é um processo essencial na restauração da homeostasia local e regeneração tecidual. Em estudos anteriores, observamos que animais FAT-1, os quais produzem endogenamente ácidos graxos n-3 como o EPA (ácido eicosapentaenoico) e o DHA (ácido docosahexaenóico) principalmente, apresentam atraso no processo de cicatrização. Estes animais apresentam maior atividade da enzima mieloperoxidase (MPO), um marcador indireto da migração de células inflamatórias. Ao mesmo tempo, em cultura primária de macrófagos isolados do peritônio destes animais, a produção de quimiocinas pró-inflamatórias como a quimiocina derivada de queratinócitos (KC) e a produção de espécies reativas de oxigênio (EROs), estiveram aumentadas. Observamos também, redução nas concentrações de interleucina 10 (IL-10), uma citocina anti-inflamatória. Deste modo, acreditamos que os animais FAT-1 estão tendo um comportamento pró-inflamatório. Entretanto, até o momento, não sabemos quais vias podem estar modificadas nestes animais. Atualmente, tem sido descrito que o sistema nervoso central (SNC) interage com o sistema imune (SI) através do nervo vago, o qual libera acetilcolina que irá agir, via receptor alpha-7 nicotínico, em células como macrófagos, inibindo a produção de mediadores inflamatórios controlando assim, a inflamação. Considerando que o processo de cicatrização está prejudicado nos animais FAT-1, pretendemos neste projeto, investigar se esta resposta envolve a via anti-inflamatória colinérgica. Para tanto, iremos avaliar a resposta inflamatória local na presença/ausência de acetilcolina em animais controle e FAT-1. Utilizaremos agonista (PNU) e antagonista (MLA) do receptor ±-7 nicotínico (alpha-7nAChR), para evidenciar a essencialidade desta via para o processo de cicatrização. Utilizaremos as técnicas de citometria de fluxo para avaliar a resposta inflamatória (ensaios de CBA) e imunofenotipagem, para acompanhar o processo de migração celular durante as diferentes fases do processo de cicatrização; Western Blotting para analisar o estado de fosforilação das proteínas da via (JAK-2 e STAT-3), bem como colorimetria para quantificar a atividade das enzimas de síntese (colina acetiltransferase) e degradação (acetilcolinesterase) de acetilcolina, principal neurotransmissor da via colinérgica. A análise da expressão gênica será realizada por PCR array específico para cicatrização de feridas, onde avaliaremos genes diretamente relacionados aos processos de migração, produção de mediadores inflamatórios, formação da matriz extracelular e remodelamento.

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

CANDREVA, THAMIRIS; KUHL, CAROLINA M. C.; BURGER, BEATRIZ; DOS ANJOS, MARIAH B. P.; TORSONI, MARCIO A.; CONSONNI, SILVIO R.; CRISMA, AMANDA R.; FISK, HELENA L.; CALDER, PHILIP C.; DE MATO, FELIPE C. P.; et al. Docosahexaenoic acid slows inflammation resolution and impairs the quality of healed skin tissue. Clinical Science, v. 133, n. 22, p. 2345-2360, NOV 2019. (14/15127-9, 13/06810-4, 16/02021-3, 16/23298-3)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

ROBLES, Thamiris Candreva. Cicatrização de feridas em camundongos FAT-1: envolvimento da via anti-inflamatória colinérgica = Wound healing in FAT-1 mice: involvement of the cholinergic anti-inflammatory pathway. 2017. Dissertação de Mestrado - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Ciências Aplicadas Limeira, SP.