Resumo
RESUMOIntrodução: Miócitos, células satélites e células mielóides são os três principais tipos celulares envolvidos nos processos de lesão e regeneração muscular. Após Lesão induzida pelo exercício físico (E.F), dois tipos distintos de células mielóides são encontrados no músculo esquelético (M.E): macrófagos (MÕs) do tipo 1 (M1) e MÕs do tipo 2 (M2). Nas fases de lesão (~12 a 24 horas), existe o predomínio de M1, e nas fases de recuperação (~36 a 48 horas), o predomínio de M2. Estes dois tipos celulares (M1 e M2), exibem um comportamento distinto, uma vez que, M1 amplificam as respostas lesivas no M.E enquanto que M2 iniciam os processos de regeneração muscular. Além de modular os fenótipos de MÕs, algumas evidências apontam que o microambiente gerado pela lesão muscular é responsável por ativar receptores neuronais periféricos que estimulam os mecanismos neuro-imuno-endócrinos de regulação tecidual, onde a acetilcolina e os glicocorticoides participam ativamente na modulação pró e anti-inflamatórias locais. Neste sentido, este trabalho tem por objetivo: Observar a interação entre macrófagos residentes no musculo esquelético e células myogênicas após lesão induzida pelo exercício físico em camundongos CX3CR1-GFP/+. Métodos: será realizada uma sessão de E.F downhill (E.F excêntrico em esteira inclinada (-16°), composta de 18 tiros de 5min. na velocidade média de 17mts/min. intervalado por 2 min. de repouso. Os M1 e M2 serão extraídos do musculo quadríceps mediante a técnica de citometria de fluxo através do cell sorter imediatamente, 24,48 e 72 horas após E.F. Após isolar os subtipos de macrófagos, serão realizados experimentos em cultura de mioblastos e cortes histológicos para evidenciar a influência destes macrófagos sobre a diferenciação de miócitos. Além da separação dos fenótipos M1 e M2, serão avaliadas também, a expressão gênica de moléculas envolvidas com a transcrição da via NFkB, receptores nicotínicos de acetilcolina e receptores de glicocorticoides. Análise estatística: os dados serão submetidos ao teste de normalidade de Kolmogorov-Smirnov, determinando assim o teste estatístico mais adequado levando em conta o desenho experimental.
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