Avaliação da expressão gênica da imunidade natural em células DF-1 transfectadas por lentivirus recombinante e infectadas com o vírus da Doença de Gumboro

• Processo: 16/13890-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2016
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2018
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Medicina Veterinária Preventiva
• Acordo de Cooperação: BBSRC, UKRI
• Pesquisador responsável: Clarice Weis Arns
• Beneficiário: Michael Edward Miller
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 14/50696-4 - Dissecting essential roles of chicken interferon stimulated genes in the pathobiology of poultry viruses, AP.R
• Assunto(s): Virologia Imunidade inata Expressão gênica Lentivirus Doença de Gumboro Reação em cadeia da polimerase em tempo real
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: expressão gênica | imunidade natural | Lentivírus recombinante | Vírus da Doença de Gumboro | Virologia

Resumo

O vírus da doença de Gumboro (IBDV), causa doença aguda, altamente contagiosa e imunossupressora em frangos jovens. Linfócitos B são os principais alvos para IBDV, porém dados indicam que o vírus também infecta e replica-se em fibroblastos de embrião de galinha, induzindo a produção de mediadores pró-inflamatórios e citocinas, cujos picos ocorrem no início da fase de replicação ativa do vírus. Estes mediadores são produtos de genes estimulados por interferon (ISGs), porém pouco se sabe sobre sua atividade antiviral, especificidade alvo e seus mecanismos de ação em aves. Neste estudo aplicaremos a reação em cadeia da polimerase em tempo real (qPCR) para (ISGs) a fim de se avaliar a dinâmica da expressão desses genes. Células de linhagem (DF-1) serão infectadas com IBDV e transfectadas por lentivirus expressando (ISGs) caracterizados. Estas serão lisadas com TRIzol e o método de quantificação relativa será utilizado para descrever a mudança de expressão dos genes alvo em relação ao grupo controle. Espera-se obter um perfil de expressão gênica que possa correlacionar-se à patobiologia do vírus tanto in vitro quanto em infecções naturais. (AU)