Análise da diversidade da microbiota supra e subgengival e perfil de proteínas da saliva e da película do esmalte de indivíduos com periodontite crônica e sucessão microbiana

• Processo: 16/13159-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2016
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2021
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia - Periodontia
• Pesquisador responsável: Marcia Pinto Alves Mayer
• Beneficiário: Dione Kawamoto
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 15/18273-9 - Novas estratégias para o controle das periodontites, AP.TEM
• Assunto(s): Proteoma Periodontite crônica Saliva Microbiologia oral
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Microbioma | película adquirida | periodontite crônica | Proteoma | saliva | Microbiologia Oral

Resumo

A periodontite crônica (PC) é associada à disbiose da microbiota oral, onde a sucessão microbiana determinada principalmente por P. gingivalis leva a formação de um biofilme patogênico, capaz de induzir uma resposta inflamatória destrutiva no hospedeiro. A saliva possui um importante papel na manutenção da homeostase oral e biomoléculas da saliva podem prover informações a respeito de vários órgãos e sistemas, e sua composição influencia a composição microbiana e reflete a resposta imune. Hipótese: Este projeto visa testar a hipótese de que pacientes com PC apresentam diferenças na composição salivar em relação a indivíduos com periodonto sadio (PS) resultando em diferenças na película adquirida que se refletem na microbiota oral. Estas diferenças na composição da saliva podem interferir em outros processos como na capacidade de imunomodulação e atividade antimicrobiana da saliva. Serão avaliados pacientes com PC e seus controles quanto à diversidade da microbiota do biofilme oral e fecal, caracterizado o perfil de proteínas da saliva, película adquirida e de citocinas salivares. Além disso, será determinada a influência da composição da película adquirida em interferir na adesão e formação de biofilme. O efeito imunomodulador e a atividade antimicrobiana da saliva será determinado em ambos os grupos. Métodos: Serão selecionados indivíduos com PC e indivíduos controle com PS. Serão coletadas amostras de biofilme supra e subgengival, saliva total estimulada e não estimulada, de parótida, película do esmalte, e fezes. A diversidade microbiana de fezes e biofilme será realizada após amplificação de 16SrRNA seguida de sequenciamento de alta performance. O perfil de proteínas da saliva e película será determinado por espectrometria de massa. O perfil de citocinas da saliva será determinado usando o sistema MagPix. A atividade imunomodulatória de saliva de pacientes PC e PS será determinada em macrófagos ativados com LPS, e a atividade antimicrobiana determinada por qPCR de viáveis. O papel da composição da película em interferir na composição do biofilme e da saliva em agregar microrganismos será determinado em ensaio de biofilme microcosmo, com película formada com saliva, seguindo-se ensaio com bactérias isoladas. Os resultados das diferentes técnicas serão avaliados conjuntamente, de maneira a selecionar potenciais biomarcadores representado por proteínas salivares, variantes genéticas e grupos microbianos na cavidade oral e fezes, apresentados de maneira diferencial em PC e PS. Esperamos assim demonstrar que diferenças na composição da saliva se relacionam às diferenças no microbioma oral e fecal, com reflexo nas condições dos tecidos periodontais. (AU)

Publicações científicas

(6)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

BUENO, MANUELA R.; ISHIKAWA, KARIN H.; ALMEIDA-SANTOS, GISLANE; ANDO-SUGUIMOTO, ELLEN S.; SHIMABUKURO, NATALI; KAWAMOTO, DIONE; MAYER, MARCIA P. A.. Lactobacilli Attenuate the Effect of Aggregatibacter actinomycetemcomitans Infection in Gingival Epithelial Cells. FRONTIERS IN MICROBIOLOGY, v. 13, p. 11-pg., 2022-05-04. (16/13159-6, 17/16377-7, 16/13156-7, 16/14687-6, 15/18273-9, 17/22345-0)

KAWAMOTO, DIONE; BORGES, RODRIGO; RIBEIRO, RODOLFO ALVARENGA; DE SOUZA, ROBSON FRANCISO; AMADO, PAMELA PONTES PENAS; SARAIVA, LUCIANA; HORLIANA, ANA CAROLINA RATTO TEMPESTINI; FAVERI, MARCELO; MAYER, MARCIA PINTO ALVES. Oral Dysbiosis in Severe Forms of Periodontitis Is Associated With Gut Dysbiosis and Correlated With Salivary Inflammatory Mediators: A Preliminary Study. FRONTIERS IN ORAL HEALTH, v. 2, p. 15-pg., 2021-10-11. (16/13159-6, 15/18273-9)

ISHIKAWA, KARIN HITOMI; MITA, DANIELA; KAWAMOTO, DIONE; NICOLI, JACQUES ROBERT; ALBUQUERQUE-SOUZA, EMMANUEL; LORENZETTI SIMIONATO, MARIA REGINA; ALVES MAYER, MARCIA PINTO. Probiotics alter biofilm formation and the transcription ofPorphyromonas gingivalisvirulence-associated genes. JOURNAL OF ORAL MICROBIOLOGY, v. 12, n. 1, JAN 1 2020. (16/13156-7, 15/18273-9, 16/14687-6, 16/13159-6)

AMADO, PAMELA PONTES PENAS; KAWAMOTO, DIONE; ALBUQUERQUE-SOUZA, EMMANUEL; FRANCO, DIEGO CASTILLO; SARAIVA, LUCIANA; CASARIN, RENATO CORREA VIANA; HORLIANA, ANNA CAROLINA RATTO TEMPESTINI; MAYER, MARCIA PINTO ALVES. Oral and Fecal Microbiome in Molar-Incisor Pattern Periodontitis. FRONTIERS IN CELLULAR AND INFECTION MICROBIOLOGY, v. 10, OCT 8 2020. (15/00259-0, 16/14687-6, 16/13159-6, 15/18273-9)

SHIMABUKURO, NATALI; CATARUCI, AMALIA C. DE S.; ISHIKAWA, KARIN H.; OLIVEIRA, BRUNA E. DE; KAWAMOTO, DIONE; ANDO-SUGUIMOTO, ELLEN S.; ALBUQUERQUE-SOUZA, EMMANUEL; NICOLI, JACQUES R.; FERREIRA, CAROLINE M.; DE LIMA, JEAN; et al. Bifidobacterium Strains Present Distinct Effects on the Control of Alveolar Bone Loss in a Periodontitis Experimental Model. FRONTIERS IN PHARMACOLOGY, v. 12, SEP 24 2021. (17/22345-0, 15/18273-9, 16/13156-7, 18/25171-6, 16/14687-6, 17/16377-7, 16/13159-6)

KAWAMOTO, DIONE; LUCAS AMADO, PAMELA PONTES; ALBUQUERQUE-SOUZA, EMMANUEL; BUENO, MANUELA ROCHA; VALE, GLAUBER CAMPOS; SARAIVA, LUCIANA; ALVES MAYER, MARCIA PINTO. Chemokines and cytokines profile in whole saliva of patients with periodontitis. CYTOKINE, v. 135, p. 9-pg., 2020-11-01. (16/13159-6, 17/16377-7, 15/00259-0, 17/10829-3, 15/18273-9)