A rede FAPESP-Keele fase 2: geração de linhagens mutantes do mosquito Aedes aegypti por CRISPR-Cas9

• Processo: 15/26199-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Pesquisa
• Vigência (Início): 17 de setembro de 2016
• Vigência (Término): 30 de janeiro de 2017
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Parasitologia - Entomologia e Malacologia de Parasitos e Vetores
• Pesquisador responsável: Jayme Augusto de Souza-Neto
• Beneficiário: Jayme Augusto de Souza-Neto
• Pesquisador Anfitrião: Julien Pelletier
• Instituição Sede: Instituto de Biotecnologia (IBTEC). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Local de pesquisa: Keele University, Inglaterra
• Vinculado ao auxílio: 13/11343-6 - Caracterização dos mecanismos de ação anti-dengue mediados pela microbiota intestinal de populações naturais do mosquito Aedes aegypti, AP.JP
• Assunto(s): Dengue CRISPR-Cas9 Imunidade inata Genética reversa Mutagênese Aedes aegypti
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Aedes aegypti | CRISPR-Cas9 | Dengue | genética reversa | imunidade inata | Mutagênese | Interação vetor-patógeno

Resumo

Para lidar com o risco de infecção provocado pela exposição a vários micróbios, os insetos desenvolveram um sistema imune com uma variedade de mecanismos de defesa que trabalham em sinergia. Recentes estudos não publicados desenvolvidos em nosso laboratório, no âmbito da rede de cooperação FAPESP-Keele, utilizando populações naturais de Aedes aegypti com níveis distintos de susceptibilidade ao DENV4, revelou que estas populações apresentam diferentes respostas transcricionais quando infectadas com o vírus. A fim de realizar testes funcionais com certos genes-alvo, a presente proposta destina-se a usar a ferramenta de edição de genoma CRISPR-Cas9 para a identificação de fatores de restrição ao vírus da dengue em Ae. aegypti. Para tal, várias linhagens mutantes de Ae. aegypti serão geradas na plataforma de transformação de insetos vetores do Centre of Applied Entomology and Parasitology (CAEP), Keele University, em colaboração com o Dr. Julien Pelletier. As linhas geradas serão trazidas ao IBTEC-UNESP, onde o teste de infecção com DENV será conduzido. (AU)