Efeitos imunomoduladores de diferentes cepas probióticas de Lactobacillus em macrófagos desafiados por Candida albicans

• Processo: 16/17166-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2016
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2017
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Luciane Dias de Oliveira
• Beneficiário: Barbara Evelyn Begnini
• Instituição Sede: Instituto de Ciência e Tecnologia (ICT). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de São José dos Campos. São José dos Campos , SP, Brasil
• Assunto(s): Imunomodulação Lactobacillus Macrófagos Candida albicans Probióticos Técnicas imunoenzimáticas Teste de Tukey
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cândida Albicans | Imunomodulação | Lactobacillus | Macrófagos | probioticos | Microbiologia Aplicada

Resumo

Cepas de lactobacilos podem possuir características probióticas, sendo uma das mais importantes a modulação do sistema imune do hospedeiro. Muitos probióticos são compostos por uma mistura de lactobacilos, no intuito de potencializar esse efeito. Com isso, o objetivo deste estudo é avaliar a imunomodulação causada por diferentes combinações de suspensões de lactobacilos em macrófagos desafiados por C. albicans, por meio da análise de citocinas pró-inflamatórias (TNF-±, IL-1², IL-6, IL-17). Para tanto, Lactobacillus rhamnosus ATCC 7469 (LR), L. acidophilus (LA), isolado de um produto comercial, e uma cepa clínica de L. paracasei (LP) serão suspendidos na concentração de 2,5 x 107 UFC/mL para obtenção de 7 suspensões finais (LR, LA, LP, LR+LA, LR+LP, LA+LP e LR+LA+LP). A cepa de Candida albicans ATCC 18804 será suspendida até a concentração de 2 x 106 UFC/mL. Macrófagos de camundongo (linhagem RAW 264.7) serão distribuídos em microplacas de poliestireno de 24 poços (5 x 105 céls/poço) e serão incubados por 24 h (37ºC/5% de CO2) para a aderência celular. Os macrófagos serão ativados por cada suspensão probiótica e em seguida serão desafiados por C. albicans. Os testes serão realizados em triplicata, sendo 4 repetições em cada, totalizando 12 amostras para cada grupo experimental. Após incubação por 16 h a 37ºC e 5% CO2, o meio DMEM com o sobrenadante celular será coletado, aliquotado e congelado em freezer (-80ºC) para a posterior análise das citocinas. Será avaliada a produção de citocinas pró-inflamatórias (TNF-±, IL-1², IL-6, IL-17) pelo método imunoenzimático ELISA. Os resultados serão analisados estatisticamente de acordo com sua distribuição normal (ANOVA e Tukey ou Kruskal-Wallis e Dunn), com nível de significância de 5%.

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

DE OLIVEIRA, FELIPE EDUARDO; ROSSONI, RODNEI DENNIS; DE BARROS, PATRICIA PIMENTEL; BEGNINI, BARBARA EVELYN; JUNQUEIRA, JULIANA CAMPOS; CARDOSO JORGE, ANTONIO OLAVO; PEREIRA LEAO, MARIELLA VIEIRA; DE OLIVEIRA, LUCIANE DIAS. Immunomodulatory effects and anti-Candida activity of lactobacilli in macrophages and in invertebrate model of Galleria mellonella. Microbial Pathogenesis, v. 110, p. 603-611, SEP 2017. (16/17166-7)