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Plataforma de monitoração da resposta celular segundo a ativação da autofagia

Processo: 16/24435-4
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2017
Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2017
Área de conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica
Pesquisador responsável:Waleska Kerllen Martins Gardesani
Beneficiário:Cleidiane de Sousa Rocha
Instituição Sede: Universidade de Santo Amaro (UNISA). São Paulo , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:16/07642-6 - A ativação/inibição da autofagia pelos triterpenóides e o impacto da interação em membranas: implicações terapêuticas antitumorais, AP.R
Assunto(s):Morte celular   Autofagia   Células tumorais   Triterpenos pentacíclicos
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Autofagia | celulas tumorais humanas | morte celular | Triterpenóides | Biologia celular e molecular

Resumo

A ideia do Projeto a qual se vincula essa bolsa TT baseia-se originalmente na modulação da autofagia mediante indução de estresse extrínseco bioquímico mediado por isômeros pentacíclicos triterpenóides - ácidos betulínico (AB) e oleanólico (AO). A modulação da autofagia fundamenta-se no conceito de dano paralelo em membranas de lisossomas e mitocôndrias, cuja extensão do comprometimento mitofágico sinaliza para resgate, morte ou envelhecimento celular de queratinócitos humanos. Em todos os modelos biológicos a correlação da autofagia com diminuição da sobrevida celular será avaliada usando-se uma plataforma de inovação biotecnológica originalmente estabelecida por Martins e colaboradores. Essa plataforma possibilita a análise simultânea de várias condições biológicas e tratamentos, correlacionando-se a resposta celular com a indução de autofagia, mensurada por uma variável numérica arbitrária (AAU). Para todas as amostras biológicas do estudo, ao se avaliar a indução de autofagia por AAU, segundo o tratamento com os triterpenóides, é possível atestar o grau de eficiência do fluxo autofágico em vigência da presença do inibidor lisossomal Bafilomicina A1. A extensão do comprometimento autofágico e sua correlação com a diminuição de sobrevida celular segundo o tempo, atribui ao composto habilidade de induzir morte celular associada à autofagia, mais a longo prazo senescência e envelhecimento celular. Para que esses esforços sejam prontamente executados, torna-se necessário um suporte técnico em Serviço de Biologia celular, cuja qualidade dos serviços irá de suma maneira contribuir para o desenvolvimento do Projeto de Auxílio Regular em questão. Seguindo essa premissa, essa proposta propõe um plano de atividades que possam dar suporte técnico-científico a proponente. Para isso, pretende-se a construção de um plano operacional voltado 1) ao cultivo de linhagens tumorais e manutenção do serviço de Biologia celular; 2) à análise de citotoxicidade in vitro após o tratamento com AB e AO, usando-se as linhagens celulares humanas de câncer de pulmão (A549), fígado (HepG2), cólon (HT29), mama (MCF7), melanoma (SKMEL-25) e próstata (PC3); 3) ao estudo da morte celular e indução de senescência associada à autofagia através da estratégia AAU. (AU)

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