Caracterização e localização dos genes controladores da pressão arterial pela metodologia ENU

• Processo: 17/05352-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2017
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2020
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: José Eduardo Krieger
• Beneficiário: Roberto Braz Pontes Junior
• Instituição Sede: Instituto do Coração Professor Euryclides de Jesus Zerbini (INCOR). Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da USP (HCFMUSP). Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 13/17368-0 - Genômica cardiovascular: mechanismos & novas terapias - CVGen mech2ther, AP.TEM
• Bolsa(s) vinculada(s): 17/14448-4 - Caracterização e localização dos genes controladores da pressão arterial pela metodologia ENU, BE.EP.PD
• Assunto(s): Cardiologia Pressão sanguínea Genes reguladores Exoma Fenótipo Modelos animais
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: abordagem fenótipo dirigida | Genes candidatos | mutagênese aleatória | pressão arterial | Cardiologia

Resumo

A Hipertensão Arterial afeta um bilhão de pessoas no mundo e é o maior fator de risco para doenças cardiovasculares. Entre os pacientes hipertensos, cerca de 95% são caracterizados pela chamada Hipertensão primária, ou essencial, cujas causas continuam desconhecidas. O fator genético é muito importante neste tipo de Hipertensão, considerando que a herdabilidade da pressão arterial sistólica e diastólica varia de 25 a 68%, de acordo com a população. Estratégias genômicas em humanos revelaram mais de 100 variantes genéticas associadas ao controle da pressão arterial e à hipertensão, no entanto, essas variantes individualmente ou coletivamente explicam apenas 1-2% da variação da pressão arterial em humanos. Contribuindo para a dificuldade da identificação da causa da hipertensão essencial, os estudos de mapeamento e refinamento de traços quantitativos em ratos, têm demonstrado resultados limitados apesar do grande tempo e dos recursos despendidos. Wang e colaboradores recentemente descreveram uma metodologia utilizando a abordagem fenótipo dirigida, proporcionando uma ferramenta de bioinformática capaz de analisar rapidamente os resultados genotípicos e fenotípicos, a fim de oferecer uma associação robusta entre os resultados. Dessa forma, o objetivo desse trabalho é caracterizar os genes reguladores da pressão arterial pela abordagem fenótipo dirigida e ENU. Para tanto, todas as mutações ocasionadas pelo ENU serão identificadas através do sequenciamento do exoma do progenitor G1 e sua zigosidade será estabelecida nos camundongos G2/G3 antes da avaliação fenotípica. Os animais G3 serão submetidos à avaliação da pressão arterial por pletismografia caudal, entre 10-14 semanas de vida. Os traços quantitativos de pressão arterial serão então analisados com o software Linkage Analyzer em pedigrees únicos ou considerando múltiplos pedigrees, detectando a ligação significativa entre mutações individuais e scores aberrantes no fenótipo. Uma vez estabelecida a relação, a confirmação será realizada pelo desenvolvimento e o estudo de animais knockout. Considerando este procedimento, previamente estabelecido para gerar e fenotipar animais mutantes, além do fato de que a clonagem posicional já estará finalizada quando a fenotipagem dos animais estiver concluída, acreditamos que essa estratégia possibilitará, de forma única, caracterizar sistematicamente genes reguladores da pressão arterial em camundongos. (AU)