Expressão funcional de AGO2: estudo do papel do 'coração do complexo RISC' no desenvolvimento da retina

• Processo: 17/26388-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2018
• Data de Término da vigência: 29 de fevereiro de 2020
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Acordo de Cooperação: Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
• Pesquisador responsável: Alexandre Hiroaki Kihara
• Beneficiário: Marília Inês Móvio
• Instituição Sede: Centro de Matemática, Computação e Cognição (CMCC). Universidade Federal do ABC (UFABC). Ministério da Educação (Brasil). Santo André , SP, Brasil
• Assunto(s): MicroRNAs
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Ago2 | gene silencing | miRNA biogenesis | retinal development | miRNAs

Resumo

MicroRNAs (miRNAs) são pequenos RNAs não codificantes (cerca de 20 nucleotídeos) que controla o nível proteico de uma forma pós-transcricional por complementariedade ao RNA mensageiro alvo (RNAm). A ação dos miRNAs depende de mecanismos mediados pelo complexo de silenciamento induzido por RNAs (RISC), e o conhecimento sobre a expressão tanto dos componentes como da ação desse complexo é ainda muito limitado. Nesse contexto, é particularmente interessante o papel da Argonauta 2 (AGO2), uma enzima essencial para o complexo RISC, e que é diretamente envolvida no desenvolvimento pós-natal devido à sua importância na maturação e proliferação celular. Portanto, considerando a falta de estudos descritivos acerca das proteínas relacionadas aos miRNAs, e a relevância de AGO2, os principais objetivos desse presente estudo são: 1) descrever a presença de AGO2 em tipos celulares retinianos específicos tanto no desenvolvimento como na retina adulta; 2) através de técnicas in vivo e in vitro, determinar o papel de AGO2 na progressão do ciclo celular; 3) combinando estratégias de inibição farmacológica e knockdown, determinar o papel de AGO2 na diferenciação de subtipos neuronais específicos. Para isso, será utilizado técnicas de biologia molecular e celular como silenciamento genético através do uso de morfolinos, intervenção farmacológica, análise de imunofluorescência, PCR em tempo real, western blotting, cultura primária e citometria de fluxo. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

MOVIO, MARILIA INES; DE LIMA-VASCONCELLOS, THEO HENRIQUE; DOS SANTOS, GABRIELI BOVI; ECHEVERRY, MARCELA BERMUDEZ; COLOMBO, ELISABETTA; MATTOS, LEONARDO S.; RESENDE, RODRIGO RIBEIRO; KIHARA, ALEXANDRE HIROAKI. Retinal organoids from human-induced pluripotent stem cells: From studying retinal dystrophies to early diagnosis of Alzheimer?s and Parkinson?s disease. SEMINARS IN CELL & DEVELOPMENTAL BIOLOGY, v. 144, p. 10-pg., 2023-03-17. (21/14227-3, 21/03711-1, 19/17892-8, 20/02035-0, 20/11667-0, 21/11969-9, 17/26388-6)