Dissecar o mecanismo molecular para ativação do receptor serpentino 12 de Plasmodium falciparum em sistemas de mamíferos

• Processo: 18/06729-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 03 de setembro de 2018
• Data de Término da vigência: 02 de julho de 2019
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Célia Regina da Silva Garcia
• Beneficiário: Pedro Henrique Scarpelli Pereira
• Supervisor: Michel Bouvier
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCF). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Université de Montréal, Canadá
• Vinculado à bolsa: 17/16307-9 - Dissecar o papel da divisão mitocondrial no controle do ciclo celular de P. falciparum e perfil de resistência a drogas em cepas resistentes, BP.DD
• Assunto(s): Biologia computacional Transdução de sinais Malária Receptores acoplados a proteínas G Parasitemia Plasmodium
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Gpcr | malária | Plasmodium | sinalização celular | Sinalização Celular

Resumo

O projeto aqui descrito visa a caracterização do receptor serpentino 12 (PfSR12) de parasitas do Plasmodium falciparum. Diferentemente do que foi descrito na literatura por experimentos de bioinformática que mostraram PfSR12 como um receptor purinérgico, não observamos liberação de Ca2 + em nosso sistema HEK297T após tratamentos com purina, mas observamos uma resposta estatisticamente significativa na liberação de Ca2 + após a adição de trombina à cultura celular. As indicações de que PfSR12 seria um receptor de trombina são de grande importância, uma vez que proteínas parasitas capazes de interagir com moléculas do sistema de coagulação do hospedeiro ainda não são conhecidas e a presença de receptores ativados por proteases é extremamente rara. Após a identificação da trombina como ligante para PfSR12, verificamos a ação dessa proteína em uma cultura in vitro de P. falciparum. A suplementação do meio de cultura com trombina não alterou a duração do ciclo do parasito, o tempo total de cada estágio do ciclo nem a morfologia do parasito. No entanto, um aumento na parasitemia foi observado em culturas incubadas com trombina quando comparadas com culturas não suplementadas. Temos razões para acreditar que a trombina interage diretamente com o parasita, influenciando o processo de saída/invasão de novas células. A ação da trombina pode ser mediada pelo PfSR12, que induz uma cascata de sinalização que culmina em uma maior eficiência do processo de invasão/saída, ou mesmo na formação de novas células. Os experimentos descritos neste projeto nos permitirão definir aspectos moleculares da via de sinalização da trombina e SR12. (AU)