Preparo, manutenção e controle de qualidade de cultura de fatias de cérebro humano adulto

• Processo: 19/22299-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2019
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2020
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica
• Pesquisador responsável: Adriano Silva Sebollela
• Beneficiário: Niele Dias Mendes
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 14/25681-3 - Bases moleculares da toxicidade de oligômeros protéicos associados a amiloidoses do sistema nervoso, AP.JP
• Assunto(s): Neuroquímica Epilepsia Cérebro Cultura de células Técnicas e procedimentos de laboratório
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: cérebro | córtex | cultura | epilepsia | translacional | neuroquimica

Resumo

As culturas de fatias de cérebro humano adulto representam um importante modelo para estudos de doenças que afetam o sistema nervoso central humano adulto. A obtenção do material para esse tipo de cultura não é prejudicial ao paciente, uma vez que são utilizados pequenos fragmentos de córtex que são descartados durante os procedimentos cirúrgicos. Os objetivos do meu trabalho como bolsista TT3 serão preparar, manter e realizar testes de qualidade de rotina em culturas de fatias de cérebro humano adulto obtido a partir de tecido cortical proveniente de pacientes com Epilepsia do Lobo Temporal (ELT) submetidos ao tratamento cirúrgico. A metodologia foi recentemente padronizada por nosso grupo (Mendes et al 2018; Fernandes et al. 2019). Em resumo, fragmentos de 1x1x1 cm de córtex temporal serão obtidos de pacientes adultos com ELT resistente ao tratamento clinico e submetidos à lobectomia temporal parcial com amigdalo-hipocampectomia. Imediatamente após a remoção, os fragmentos de lobo temporal serão imersos em solução salina tamponada gelada e oxigenada artificialmente. Os tecidos serão fatiados em vibrátomo a 200 µm e cultivados por pelo menos 4 dias em meio apropriado. Rotineiramente, a viabilidade celular das fatias em cultura será avaliada por ensaio de MTT, e a integridade morfológica tecidual será avaliada por imuno-histoquímica.