Otimização de um sistema de deleção gênica por CRISPR/Cas9 em macrófagos para avaliar proteínas importantes para a ativação do inflamassoma de NLRC4

• Processo: 20/06177-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2020
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2022
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Dario Simões Zamboni
• Beneficiário: Letícia de Sousa Lopes
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 19/11342-6 - Mecanismos e consequências da ativação de receptores citoplasmáticos por patógenos intracelulares, AP.TEM
• Assunto(s): Caspase 1 Proteína 9 associada à CRISPR Repetições palindrômicas curtas agrupadas e regularmente espaçadas Imunidade inata Inflamassomos Macrófagos CRISPR-Cas9
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Caspase-1 | Cas9 | Crispr | imunidade inata | inflamassoma | Macrófagos | CRISPR/Cas9

Resumo

O inflamassoma é um complexo multiproteico que auxilia a ativação de diversas caspases inflamatórias em resposta a sinais ambientais ou a entrada de patógenos em uma célula. Logo após o reconhecimento do ligante, o complexo inflamassoma é formado e auxilia a ativação da pró-IL-1b e pró-IL-18, além de gasdermina D. A ativação do inflamassoma leva a secreção de citocinas e a morte celular inflamatória, também conhecida como piroptose. Desta forma, o inflamassoma apresenta um papel crucial na defesa do hospedeiro contra patógenos intracelulares, como Salmonella, Shigella, Legionella pneumophila e Pseudomonas aeruginosa, além de se relacionar com o aparecimento e progressão de doenças hereditárias ou inflamatórias, como a chamada MAS (Macrophage Activation Syndrome), a enterocolite de início neonatal e o glioma. Apesar de ser um dos inflamassomas mais estudados, alguns mecanismos envolvidos na via de NLRC4 ainda precisam ser identificados. Ao expandir o conhecimento sobre moléculas envolvidas em sua ativação e sinalização, será possível alcançar um melhor entendimento a respeito de doenças inflamatórias relacionadas ao mesmo, assim como o papel do inflamassoma no controle de patógenos intracelulares. Neste projeto, pretendemos utilizar a técnica de CRISPR-Cas9 para avaliar o papel de genes identificados em uma varredura realizada no nosso laboratório para proteínas que interagem com NLRC4 em resposta a infecção por Legionella pneumophila. (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

LOPES, Letícia de Sousa. Otimização do sistema de deleção gênica por CRISPR-Cas9 em macrófagos e avaliação de genes potencialmente envolvidos na ativação do inflamassoma de NLRC4. 2022. Dissertação de Mestrado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (PCARP/BC) Ribeirão Preto.