O papel de um fator de transcrição da família MarR na homeostase do ferro em Chromobacterium violaceum

• Processo: 21/09170-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2022
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2022
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: José Freire da Silva Neto
• Beneficiário: Bianca Bontempi Batista
• Supervisor: Ferric Chuwen Fang
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: University of Washington, Estados Unidos
• Vinculado à bolsa: 18/19058-2 - Caracterização de novos mecanismos regulatórios e de resistência ao ferro em Chromobacterium violaceum, BP.DR
• Assunto(s): Chromobacterium violaceum Estresse oxidativo Genética bacteriana Fatores de transcrição Toxicidade Ferro
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Chromobacterium violaceum | citocromo bd oxidase | Estresse oxidativo | Fatores de transcrição bacterianos | toxicidade do ferro | Genética bacteriana

Resumo

Os metais de transição são essenciais para a vida, atuando como cofatores em várias reações bioquímicas. Em bactérias, a homeostase de metais envolve metaloproteínas regulatórias que detectam diferentes metais e levam à ativação ou repressão de genes. A metaloproteína Fur detecta os níveis de ferro para mediar a desrepressão dos sistemas de captação de ferro sob limitação deste metal e ativação de sistemas de armazenamento e efluxo em excesso de ferro. Recentemente, outras famílias de fatores de transcrição foram descritas como responsivas a metais, como a família MarR. Durante este projeto de doutorado em andamento, realizamos uma triagem de uma biblioteca de mutantes de transposon (10.000 clones) em altas concentrações de ferro para encontrar novos genes envolvidos em aliviar a toxicidade do ferro em Chromobacterium violaceum, uma bactéria ambiental que ocasionalmente causa infecções graves em humanos. Dentre as linhagens com comprometimento do crescimento na presença de ferro, selecionamos para caracterizar neste projeto BEPE uma linhagem mutante com inserção do transposon dentro do gene CV_3659. Este gene codifica um provável fator de transcrição da subfamília GbsR, um membro da família MarR. O CV_3659 parece estar em um operon com CV_3658 e CV_3657 que codificam uma citocromo bd oxidase. Neste projeto, testaremos a hipótese de que o operon CV_3659-58-57 é necessário para a proteção de C. violaceum contra a toxicidade do ferro e estresse oxidativo. Usaremos várias abordagens genéticas, microbiológicas e bioquímicas para realizar a caracterização funcional do operon CV_3659-58-57 em C. violaceum. (AU)