Confirmação da expressão em cana transgênica a partir da detecção da proteína repórter YFP

• Processo: 21/12841-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2021
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2022
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Botânica
• Pesquisador responsável: Helaine Carrer
• Beneficiário: Pedro Boscariol Ferreira
• Instituição Sede: Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz (ESALQ). Universidade de São Paulo (USP). Piracicaba , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 14/50921-8 - Redes regulatórias e sinalização associadas à cana energia, AP.BIOEN.TEM
• Assunto(s): Biologia molecular Expressão de proteínas Microscopia de fluorescência Microscopia confocal Transgenes Estresse hídrico Secas Escassez de água Cana-de-açúcar Plantas geneticamente modificadas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: cana-de-açúcar | expressão | fluorescência | gene reporter | Ogm | biologia molecular

Resumo

Dentre os fatores que podem afetar a produtividade e qualidade das culturas agrícolas o estresse causado pela seca é o mais comum, e pode afetar negativamente a cultura da cana-de-açúcar. Estudos genômicos e transcritômicos têm permitido a identificação e clonagem de genes responsivos ao estresse hídrico, bem como sua utilização em transformações genéticas de plantas. Um gene de resposta à deficiência hídrica foi identificado em cana e utilizado na obtenção de plantas transgênicas com sua expressão induzida. A construção utilizada (GLA02) conta com o gene de interesse sob a regulação do promotor constitutivo do gene Ubi-1 de milho e está fusionado ao gene codificador da proteína repórter YFP. No total, 19 eventos transgênicos foram obtidos e já verificados por PCR, estão em desenvolvimento em casa-de-vegetação e serão submetidos a experimentos de desafio a seca (Processo FAPESP: 2018/09867-0). No entanto, uma nova etapa de screening das plantas transgênicas é necessária, na qual será verificada a expressão da proteína. Para tanto, deverão ser realizados ensaios de microscopia de fluorescência e/ou microscopia confocal, que permitirão confirmar a expressão do transgene e investigar a localização celular da proteína de interesse, a partir da visualização da proteína YFP. (AU)