O papel dos níveis suprafisiológicas de testosterona na geração de espécies reativas de oxigênio dependente de Nox5 em células endoteliais humanas

• Processo: 22/00103-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2022
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2023
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Farmacologia - Farmacologia Cardiorenal
• Pesquisador responsável: Rita de Cassia Aleixo Tostes Passaglia
• Beneficiário: Juliano Vilela Alves
• Supervisor: Thiago Bruder do Nascimento
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: University of Pittsburgh (Pitt), Estados Unidos
• Vinculado à bolsa: 19/20692-0 - Envolvimento do complexo inflamassoma NLRP3 na disfunção cardíaca associada à níveis suprafisiológicos de testosterona, BP.DR
• Assunto(s): Testosterona Níveis séricos Inflamação Espécies de oxigênio reativas NADPH oxidase 5 Células endoteliais
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Endothelial dysfunction | Nox5 | Reactive Oxygen Species | testosterone | Farmacologia Cardiovascular

Resumo

O aumento nos níveis séricos de testosterona (Testo) está associado a fatores de risco cardiovascular, incluindo obesidade abdominal e hipertensão, bem como doenças cardiovasculares (DCV). Testo pode modular positivamente processos inflamatórios, o estado redox e a atividade de várias proteínas importantes na função vascular, como os canais para cálcio. Nox5 pertence à família de nicotinamida adenina dinucleotídeo fosfato (NADPH) oxidases (Nox), e sua atividade e expressão vascular podem ser reguladas por aumentos nas concentrações de cálcio intracelular. Considerando que Testo modula as concentrações intracelulares de cálcio, este estudo testará a hipótese de que os níveis suprafisiológicos de testosterona induzem o influxo de cálcio nas células endoteliais, aumentando a geração de espécies reativas de oxigênio (ROS) por mecanismo dependente de Nox5. Considerando que o estresse oxidativo induzido por Testo levará à disfunção das células endoteliais. As células endoteliais aórticas humanas primárias (HAEC, ATCC®, Middlesex, UK; PCS-100-011) serão estimuladas com Testo (10-7 M, em diferentes tempos). Um inibidor farmacológico de Nox5 (melitina, 10-7 M), silenciamento gênico Nox5 (siRNA) e antagonista do receptor de andrógeno (flutamida, 10-5 M) serão usados para determinar se Testo leva à geração de ROS dependente de Nox5, ativação do influxo de cálcio e quinases intracelulares (ERK1/2, JNK e P38), expressão de moléculas de adesão celular (VCAM - molécula de adesão celular vascular e ICAM - molécula de adesão intercelular) e adesão de monócitos às células endoteliais. (AU)