Desenvolvimento e implementação de um modelo celular BoLA-null para caracterização imunopeptidômica de ligantes de BoLA-DR e produção de um catálogo de ligantes no sialotransciptoma de carrapatos para o desenvolvimento de uma vacina anti-carrapatos

• Processo: 22/02776-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Pós-Doutorado
• Vigência (Início): 01 de setembro de 2022
• Vigência (Término): 25 de agosto de 2023
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Parasitologia
• Pesquisador responsável: Beatriz Rossetti Ferreira
• Beneficiário: Andressa Fisch
• Supervisor: Timothy Connelley
• Instituição Sede: Escola de Enfermagem de Ribeirão Preto (EERP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Local de pesquisa: University of Edinburgh, Escócia
• Vinculado à bolsa: 18/23579-8 - Elaboração de uma vacina quimérica multicomponente recombinante baseada em epítopos de carrapatos Rhipicephalus microplus, BP.PD
• Assunto(s): Rhipicephalus microplus Vacinologia Controle de carrapatos Carrapatos Transdução de sinais Imunopeptidômica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: BoLA class II | BoLA-DR | immunopetidomics | Rhipicephalus microplus | tick vaccine | Vacinologia

Resumo

Carrapatos são importantes vetores de doenças para animais e promovem perdas significativas no setor pecuário. As vacinas atualmente disponíveis contra carrapatos apresentam resultados variáveis de proteção entre rebanhos bovinos e resposta imune de memória pouco duradoura, indicando a necessidade de desenvolvimento de vacinas mais eficientes. A sinalização de células T CD4 é essencial para o desenvolvimento de respostas de anticorpos eficazes contra patógenos, e a apresentação via MHCII é uma etapa obrigatória para a ativação celular. A caracterização imunopeptidômica de ligantes de MHCII promoveu o desenvolvimento de algoritmos de predição de alta confiabilidade, e tais ferramentas in silico podem acelerar a seleção racional de antígenos e epítopos para o desenvolvimento de vacinas, sendo de particular relevância para vacinas contra patógenos com grandes proteomas, como carrapatos. Neste projeto, propomos o deenvolvimento de uma linhagem celular BoLA-null derivada de bovinos utilizando o sistema CRISPR/Cas9, que será aplicada como uma plataforma para expressar moléculas BoLA de interesse, gerando amostras monoalélicas para caracterização imunopeptidômica. Esta plataforma será utilizada para expressar alelos BoLA-DRB3 prevalentes em raças comerciais de gado no Brasil, especificamente Nelore (gado de corte) e Girolando (gado de leite), e realizar análises imunopeptidômicas para caracterizar os motivos de ligação desses alelos. Os motivos de ligação serão usados para expandir a ferramenta de predição de ligantes de BoLAII previamente desenvolvida por nós e disponível em www.cbs.dtu.dk/services/ NetBoLAIIpan. Por fim, realizaremos uma previsão de ligantes de alto rendimento em um conjunto de dados composto por ~3600 proteínas derivadas do sialotranscriptoma do carrapato R. microplus previamente caracterizado por nosso grupo de pesquisa, para gerar um catálogo de fácil leitura de possíveis antígenos e ligantes previstos para cada alelo BoLA-DR analisado. Este catálogo reduzirá os custos e o tempo necessário para fornecer suporte de bioinformática para a triagem racional de antígenos e epítopos de carrapatos para o desenvolvimento de vacinas anticarrapatos. (AU)