Análise do bloqueio do miR-221/222 em modelo in vitro do carcinoma renal de células claras não metastático e metastático

• Processo: 23/02352-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2023
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2025
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Cirurgia
• Pesquisador responsável: Sabrina Thalita dos Reis Faria
• Beneficiário: Giovanna Tamarindo da Silveira
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FM). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Biologia molecular Biomarcadores MicroRNAs Urologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Biologia molecular | Biomarcador | Carcinoma Renal de Células Claras | miRNA | Urologia

Resumo

O Carcinoma de células renais (CCR) é uma neoplasia maligna que se origina no revestimento do túbulo contorcido proximal dos nefrons. A doença é responsável por 2% de todos os diagnósticos e óbitos de câncer no mundo e 85% de todos os tumores renais, sendo classificado como a sétima forma de neoplasia mais comum do mundo desenvolvido. O Carcinoma renal de células claras (CRCC) é o subtipo mais comum, sendo responsável por 75% dos carcinomas renais. O CRCC é associado a síndrome autossômica dominante de Von Hippel Lindau, onde ocorre a inativação do gene supressor tumoral VHL. Nos últimos anos, descobriu-se que grupos de microRNAs (miRNA) possui uma expressão aberrante em tecidos neoplásicos incluindo o CRCC, tendo atraído cada vez mais atenção devido as suas associações com o prognóstico do CRCC e o potencial de se tornarem alvos terapêuticos. Os miR-221/222 podem ser regulados positivamente ou negativamente em diversos tipos de câncer, sendo que no CRCC, um estudo demonstrou que além da expressão aberrante de miR 221 e 222 em tecidos de pacientes com CRCC, a superexpressão ectópica do miRNA 221 e 222 resulta na redução do gene p27 (Kip-1), inibidor de quinases dependentes de ciclina, com papel crucial na regulação do ciclo celular. Aqui em nosso estudo avaliaremos o efeito da inibição destes microRNAs em linhagens celulares metastáticas e não metastáticas do CRCC. As células a serem utilizadas pertencem a duas diferentes linhagens: 786-O e Caki-1 que serão então transfectadas com o anti-miR-221 e 222. Após a transfecção realizaremos a extração do miRNA e avaliaremos a expressão do miR221 e 222 por qPCR para análise da eficácia da transfecção. Para avaliação do efeito do bloqueio destes microRNAs realizaremos os ensaios de invasão, migração e formação de colônias.