Aplicação da técnica de mascaramento de epítopos utilizando G. mellonella como modelo na infecção por C. neoformans

• Processo: 23/17852-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2024
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2025
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Farmácia
• Pesquisador responsável: Andrei Moroz
• Beneficiário: Kelvin Sousa dos Santos
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCFAR). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 23/03240-4 - Estudo do potencial terapêutico de peptídeos gerados por Galleria mellonella utilizando a técnica de mascaramento de epítopos, AP.R
• Assunto(s): Biologia celular Galleria mellonella
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Animais alternativos | biologia celular | Galleria mellonella | mascaramento de epitopos | Biologia Celular- Imunologia

Resumo

Estudos voltados para as patologias humanas desempenham um papel crucial na pesquisa de alvos terapêuticos e possíveis tratamentos. No cenário atual, uma das questões prementes refere-se à escolha dos animais apropriados para conduzir tais estudos, dado o vasto espectro de desdobramentos tanto científicos quanto éticos associados a esse tema. Considerando que historicamente animais vertebrados e mamíferos foram utilizados na pesquisa, e políticas estabelecidas atualmente não condizem mais com algumas aplicações direcionadas a esta prática, nesse contexto, a utilização de animais alternativos surge como uma valiosa ferramenta para investigações in vivo, em virtude de sua complexidade celular e das vias metabólicas que podem esclarecer aspectos relacionados ao estudo das doenças.Um exemplo de animal que tem se destacado como aliado nas pesquisas sobre doenças é a Galleria mellonela, um inseto pertencente à ordem dos lepidópteros, popularmente conhecido como traça do mel. Seu estágio larval desperta grande interesse na comunidade científica devido à diversidade de possibilidades investigativas que oferece, incluindo a análise da resposta imune mediada por hemócitos e peptídeos. Essa resposta, descrita por alguns autores como uma manifestação humoral da larva, é fundamental para compreender os mecanismos relacionados ao desenvolvimento de doenças. Uma linha adicional de pesquisa associada à Galleria mellonela envolve sua aplicação nos estudos da interação hospedeiro-fungo. Pesquisas indicam que, ao infectar o inseto com Cryptococcus neoformans, é possível obter resultados que delineiam a patogênese, relacionando-a aos fatores de virulência do fungo e à resposta imune inata.Na vertente da busca por metodologias inovadoras para descoberta de biomarcadores tumorais e potenciais alvos terapêuticos, destaca-se a técnica de mascaramento de antígeno. Essa abordagem, ao modular o sistema imune, direciona a geração de anticorpos contra epítopos raros de baixa expressão, os quais podem desempenhar papel relevante no desenvolvimento de diversas doenças, incluindo as infecciosas, autoimunes e o câncer.Dessa forma, o presente projeto propõe a aplicação da técnica de mascaramento de epítopos com o objetivo de restringir a exposição de antígenos ao sistema imune da Galleria mellonela. Pretende-se avaliar a resposta imune do inseto, especialmente no que diz respeito à produção de peptídeos antimicrobianos, comparando-a com a plasticidade da resposta imune quando exposta ao microrganismo sem mascaramento. As análises envolvem o isolamento e a purificação de peptídeos por cromatografia, assim como a caracterização biológica desses peptídeos em relação ao microrganismo utilizado como imunizante. Além disso, o sequenciamento por espectrometria de massas será empregado para identificar a composição de aminoácidos presentes nos peptídeos produzidos em diferentes contextos.