Papel da Transidrogenase Mitocondrial de NAD(P)+ (NNT) na Resposta Neuroinflamatória e Proliferação de Células de Glioblastoma em Cultura

• Processo: 24/10257-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2024
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Metabolismo e Bioenergética
• Pesquisador responsável: Roger Frigério Castilho
• Beneficiário: Paulo Francisco Veiga Bizerra
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Médicas (FCM). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 23/00229-0 - Papéis fisiopatológicos da NAD(P)+ transidrogenase mitocondrial, AP.TEM
• Assunto(s): Glioblastoma Inflamação Mitocôndrias NADP Bioenergética mitocondrial
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: balanço redox | glioblastoma | Inflamação | mitocôndria | Nadph | Transidrogenação | Bioenergética mitocondrial

Resumo

A transidrogenase mitocondrial de NAD(P)+ (NNT) é uma proteína transmembrana que catalisa a transferência de um hidreto entre o NAD(H) e o NADP(H) acoplada ao transporte de um próton entre o espaço intermembranar e a matriz mitocondrial; esse processo pode ocorrer tanto no sentido da geração de NADPH quanto de NADH (isto é, reações direta e reversa). Embora ambas as reações sejam fisiologicamente relevantes, o NADPH gerado pela atividade da NNT destaca-se por fornecer poder redutor a sistemas de detoxificação de peróxidos e por participar de reações anabólicas. O presente projeto tem como objetivo evidenciar o papel da NNT na neuroinflamação e proliferação e viabilidade de astrócitos e células de glioblastoma em cultura. Para tal, serão conduzidos estudos comparativos utilizando-se cultura de microgliócitos e astrócitos obtidos de camundongos C57BL/6 que possuem uma mutação espontânea no gene da Nnt (C57Unib.B6-Nnt-/-), que resulta em ausência de expressão da proteína, e de camundongos congênicos controles com expressão desta proteína (C57Unib.B6-Nnt+/+). Quanto às células de glioblastoma humano, serão utilizadas linhagens de células imortalizadas. Os objetivos específicos do projeto são: i) Estudar a resposta inflamatória de astrócitos e microgliócitos obtidos de camundongos Nnt+/+ e Nnt-/-; ii) Caracterizar a importância da NNT na sinalização redox e proliferação de astrócitos em cultura e efeito de inibidores da respiração e fosforilação oxidativa nesse modelo; iii) Avaliar o efeito do silenciamento de NNT na sinalização redox, proliferação e viabilidade de células de glioblastoma e astrócitos em cultura; iv) Estudar o efeito do silenciamento da expressão de NNT em células de glioblastoma tratadas com o quimioterápico temozolomida ou expressando mutação em IDH1.