Validação funcional da "WW domain-containing protein 2" (WWP2) como alvo molecular para o tratamento da osteoartrite

• Processo: 24/10173-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2024
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunoquímica
• Acordo de Cooperação: GlaxoSmithKline
• Pesquisador responsável: Denise Vilarinho Tambourgi
• Beneficiário: Bruna Fernandes Pinto
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Empresa: Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). Instituto Butantan
• Vinculado ao auxílio: 20/13139-0 - Centro de Excelência na Descoberta de Novos Alvos, AP.PCPE
• Assunto(s): Terapia de alvo molecular Condrócitos Osteoartrite Pararamose Premolis semirufa Sinoviócitos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: alvos moleculares | Condrócitos | Osteoartrite | Pararamose | Premolis semirufa | Sinoviócitos | alvos moleculares

Resumo

Nosso grupo vem demonstrando que componentes presentes no extrato das cerdas da pararama, nome popular da fase larval da mariposa Premolis semirufa, induzem alterações moleculares em condrócitos humanos que se assemelham ao observado na patogênese da osteoartrite (OA). Essas alterações incluem intensa resposta inflamatória com produção de citocinas, imunomediadores e remodelamento da matriz extracelular. Análises do perfil transcriptômico dessas células também revelaram uma clara assinatura gênica com alterações de marcadores moleculares característicos da OA. Esses resultados despertaram o interesse no uso de condrócitos tratados com o extrato das cerdas de pararama como modelo de OA para a descoberta e validação de alvos moleculares com potencial terapêutico. Até o momento, as terapias para a OA se baseiam no uso de anti-inflamatórios e reposição de componentes da cartilagem. Portanto, moléculas com funções condroprotetoras e com potencial de diminuir a progressão da doença são objetivos de novos estudos. Nesse contexto, a proteína com domínios Ww2 (Wwp2) foi selecionada para validação funcional. A Wwp2 é uma ubiquitina ligase intracelular. Durante a condrogênese, ela promove a regulação positiva do Sox9 pelo domínio amino-terminal, enquanto induz a degradação do RunX2 por ubiquitinação, função desenvolvida pelo domínio carboxi-terminal da proteína. Esses dois fatores de transcrição, RunX2 e Sox9, possuem papéis antagônicos bem estabelecidos na OA. Sox9 é essencial para a homeostase dos condrócitos e consequente proteção da cartilagem, em contraste com a indução da diferenciação hipertrófica dos condrócitos e degradação da cartilagem por RunX2. Interessantemente, a expressão da WWP2 é gradativamente reduzida com a progressão da doença. Em síntese, aumentar a biodisponibilidade da WWP2 pode ajudar a restaurar as condições saudáveis da cartilagem em pacientes com OA. O objetivo central desse projeto é validar a importância da Wwp2 na osteoartrite (OA) usando condrócitos tratados com extrato de cerdas de pararama como modelo celular para o estudo da doença. Para tanto, os níveis de expressão (mRNA e/ou proteína) do alvo e de moléculas relacionadas com a mesma via de sinalização serão analisados, validando o modelo para os estudos funcionais. Em seguida, os efeitos na modulação gênica da Wwp2 (proteína completa, porção amino-terminal e porção carboxi-terminal) na expressão de marcadores moleculares da OA serão avaliados, gerando evidências de que domínios diferentes da proteína podem exercer funções distintas e que a modulação do alvo leva a efeitos clinicamente relevantes. Finalmente, os efeitos da modulação do alvo na comunicação dos condrócitos com outras células da articulação, como macrófagos e sinoviócitos, serão avaliados a fim de determinar seu papel em um contexto mais abrangente da patogênese da OA. (AU)