Avaliação funcional de variantes germinativas nos genes das fosfodiesterases 2A (PDE2A) e 3A (PDE3A) no hiperaldosteronismo primário bilateral.

• Processo: 24/18510-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2024
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2026
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Madson Queiroz Almeida
• Beneficiário: Jose Antonio Barbosa Lima Sobrinho
• Instituição Sede: Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da USP (HCFMUSP). Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 19/15873-6 - Investigação de novos aspectos genéticos, clínicos e anatomopatológicos da hipertensão arterial de origem endócrina, AP.TEM
• Assunto(s): Aldosterona Endocrinologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: aldosterona | Fosfodiesterases | hiperaldosteronismo primário | Hipertensão secundária | Pka | variantes germinativas | Endocrinologia

Resumo

O hiperaldosteronismo primário (HP) é uma condição caracterizada pela secreção autônoma excessiva de aldosterona pela glândula adrenal, não regulada pelo sistema renina-angiotensina-aldosterona. O HP é a causa mais comum de hipertensão secundária e está associada a um aumento do risco cardiovascular. O HP pode ser unilateral em 30-40% dos casos ou bilateral em 50-60% dos casos. O HP familial é raro, acometendo 1-5% dos pacientes. Embora o HP bilateral seja a causa mais frequente de HP, poucos avanços foram feitos na elucidação das suas bases genéticas. Recentemente, realizamos o sequenciamento completo do exoma de 36 pacientes com HP bilateral com hipertensão estágio 3 ou resistente e diagnóstico da hipertensão antes dos 40 anos. Variantes germinativas raras foram identificadas nos genes das fosfodiesterases 2A (PDE2A c.2469G>A / p.Ala823Ala) e 3A (PDE3A c.635T>G / p.Val212Gly) em 2 de 36 (5,5%) desses pacientes. Em estudo prévio do nosso grupo, uma variante germinativa na PDE2A (c.1885A>G; p.Ile629Val) foi identificada em uma paciente com HP bilateral diagnosticado aos 20 anos. A PDE2A foi fortemente expressa nas áreas hiperplásicas e micronódulos das hiperplasias adrenais. Adicionalmente, uma forte expressão da PDE2A foi observada exclusivamente na zona glomerulosa de adrenais normais. A variante sinônima identificada no gene PDE2A, apesar de aparentemente silenciosa, está localizada no último nucleotídeo do éxon 28, próximo ao sítio canônico de splicing (doador) em IVS28. A predição in silico sugere patogenicidade com potencial para causar o skipping do exon adjacente. O objetivo desse estudo é realizar o estudo funcional in vitro das variantes germinativas nos genes PDE2A (c.2469G>A / p.Ala823Ala e c.1885A>G / p.Ile629Val) e PDE3A (c.635T>G / p.Val212Gly) na linhagem de tumor adrenal NCI H295R-S2. Os estudos funcionais incluirão: cultura de células, mutagênese, transfecção, ensaio de minigene, RNA de interferência, PCR em tempo real, Western blot, mensuração da atividade de PKA e proliferação celular.