Caracterização fenotípica e genotípica de bacilos gram-negativos resistentes a antimicrobianos de interesse clinico isolados de gatos saudáveis

• Processo: 24/01213-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Ana Lúcia da Costa Darini
• Beneficiário: Stella Cabral
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): beta-Lactamases Farmacorresistência bacteriana Resistência microbiana a medicamentos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: beta-Lactamases | one health | PETs | Resistência Bacteriana | Resistencia a antibióticos

Resumo

A resistência aos antimicrobianos é considerada problema de saúde pública global. A disseminação de genes de resistência é questão crítica, especialmente no contexto da abordagem Saúde Única, que traz a ideia de conexão entre a saúde humana, animal e meio ambiente. O objetivo do projeto é identificar e caracterizar fenotípica e genotipicamente bacilos gram-negativos (BGN) resistentes à antibióticos isolados de suabes retais de gatos saudáveis, sem manifestações clínicas e que não tenham sido tratados com antibióticos no último mês. Para isso, a seleção dos isolados está sendo feita em meio de cultura MacConkey (Oxoid), acrescido de cefotaxima (MC-CTX) na concentração de 2µg/mL. As amostras bacterianas estão sendo identificadas por MALDI-TOF MS (Matrix Associated Laser Desorption-Ionization - Time of Flight) e as espécies do complexo Klebsiella pneumoniae e do complexo Klebsiella oxytoca estão sendo confirmadas através da plataforma MALDI TypeR do Instituto Pasteur (https://maldityper.pasteur.fr/). Além disso, está sendo determinado o perfil de sensibilidade aos antibióticos, dos BGN selecionados, pelo método de disco de difusão e interpretado como descrito e recomendado pelo Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI, 2023 e CLSI VET, 2023). A detecção dos genes de resistência aos antibióticos beta-lactâmicos, aminoglicosídeos, quinolonas mediados por plasmídeos e polimixina, assim como a diversidade genética de plasmídeos que carreiam genes de resistência de interesse serão realizadas pela reação em cadeia da polimerase (PCR). Eletroforese em campo pulsado (PFGE) será utilizado para determinar a variabilidade genética de espécies de Enterobacterales isoladas de gatos de mesmo convívio. As bactérias que apresentarem resistência aos carbapenêmicos, terão seu genoma completo sequenciado e analisado. Até o momento, já foram colhidos 76 suabes retais de gatos, sendo que 20 animais apresentaram crescimento de BGN, destes 20 gatos, foram isolados 30 BGN, sendo 16 Enterobacterales e 11 bacilos gram-negativos não fermentadores (BGN-NF). Onze Enterobacterales foram consideradas multirresistentes (MDR), por apresentarem resistência a três ou mais classes de antimicrobianos. Sabendo que a população de gatos tem aumentado no Brasil nos últimos anos (2020-2023), o presente projeto auxiliará na contribuição com a epidemiologia dos genes de resistência aos antimicrobianos e na expansão do conhecimento sobre o potencial zoonótico dessas bactérias que podem afetar a saúde humana e animal.