Avaliação in vitro de variantes genéticas e transcriptoma espacial de células gonadais em pacientes com Distúrbios da Diferenciação do Sexo

• Processo: 25/08316-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2025
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2027
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Humana e Médica
• Pesquisador responsável: Helena Fabbri Scallet
• Beneficiário: Felipe Rodrigues de Oliveira
• Instituição Sede: Centro de Biologia Molecular e Engenharia Genética (CBMEG). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 24/00196-7 - Investigando novos processos no desenvolvimento gonadal, AP.JP
• Assunto(s): Pediatria
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: disgenesia gonadal parcial | distúrbios da diferenciação do sexo | síndrome de regressão testicular | Transcriptoma Espacial | Pediatria

Resumo

Os Distúrbios da Diferenciação do Sexo (DDS) englobam um conjunto de condições congênitas caracterizadas pelo desenvolvimento genital e/ou gonadal incompleto ou desordenado levando a uma discordância entre o sexo genético, gonadal e fenotípico. Tendo em vista que uma mesma variante genética passou a ser associada a um amplo espectro fenotípico entre indivíduos não relacionados e com alguma forma de DDS, a possibilidade de envolvimento de dois ou mais genes, de forma que seu efeito somatório poderia ocasionar em um agravamento no fenótipo, foi sugerida para descrever alguns casos de DDS. O presente estudo propõe a realização de estudos in vitro de variantes novas identificadas através de sequenciamento de NGS, que estão sendo realizadas em projetos paralelos. Para isso, diferentes técnicas serão utilizadas, como western blot e ensaios de Luciferase. A segunda parte do projeto irá incluir a técnica de transcriptoma espacial para a caracterização de células gonadais. Para isso, serão selecionadas amostras de material gonadal fixadas em parafina para realização dos cortes e preparo das lâminas. Em seguida, será feita a caracterização dessas células por imunoistoquímica, seguido do transcriptoma espacial. O objetivo será identificar alterações morfológicas em estruturas como a barreira hemato-testicular das células de Sertoli que expliquem os diferentes quadros de DDS. Essa etapa será realizada em colaboração com o grupo de pesquisa do professor Olaf Hiort, pesquisador associado a essa proposta, da Universidade de Luebeck, Alemanha. (AU)