Sistema de secreção do tipo VI de Chromobacterium violaceum: estudo da regulação e de efetores que atuam na parede celular

• Processo: 25/10981-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2025
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: José Freire da Silva Neto
• Beneficiário: Mateus de Souza Terceti
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 21/06894-0 - Fatores de transcrição bacterianos envolvidos em homeostase de metais, estresse oxidativo e virulência: investigando como Chromobacterium violaceum muda do ambiente para o hospedeiro, AP.JP2
• Assunto(s): Chromobacterium violaceum Regulação da expressão gênica Toxinas bacterianas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Chromobacterium violaceum | Efetores antibacterianos | parede celular bacteriana | Regulação gênica | sistema de secreção do tipo VI (T6SS) | toxinas bacterianas | Genética de Bactérias

Resumo

O sistema de secreção do tipo VI (T6SS) é uma maquinaria contrátil presente em bactérias Gram-negativas que permite a translocação de proteínas efetoras, em sua maioria antibacterianas, para dentro de células-alvo. Ele é importante em competição e patogênese bacteriana, além de atuar na captação de metais escassos no ambiente. Nosso grupo tem estudado o T6SS de Chromobacterium violaceum, uma bactéria Gram-negativa ambiental capaz de causar infecções oportunistas em humanos. Demonstramos que o T6SS de C. violaceum é regulado por quorum sensing e que a sua principal função é a competição contra outras bactérias. No entanto, a maioria dos efetores antibacterianos deste T6SS ainda não foram caracterizados e as vias que regulam a sua expressão e atividade dependente de densidade celular são desconhecidas. Também não foi ainda testado se o T6SS de C. violaceum está envolvido na captação de íons metálicos. Nesse projeto, nós propomos estudar esses aspectos desconhecidos do T6SS de C. violaceum por meio de: i) varredura de uma biblioteca de transposon para mutantes com padrão de atividade alterada do T6SS, visando encontrar possíveis novas vias regulatórias; ii) avaliação da expressão de componentes do T6SS em situações de limitação de ferro e no mutante fur; iii) mutação, expressão e purificação de três possíveis efetores com potencial ação na parede celular, CV_0024, CV_2125 e CV_2665, para avaliar sua toxicidade em contexto de expressão heteróloga e de competição interbacteriana. Os resultados deste projeto devem contribuir na identificação de novos mecanismos regulatórios e na caracterização de novos efetores de um T6SS ainda pouco estudado.